Question

利用生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV，用于血友病的治疗。请回答下列问题：

根据凝血因子IV基因的碱基序列，可用____技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时，所用到的工具酶是____   _，将人凝血因子IV基因与________的启动子等调控组件重组在一起。

（2）将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是______。

（3）在体外胚胎培养时，应选用囊胚的_____进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植，此技术的优点是________。

（4）人凝血因子IV是一种胞外酶，该蛋白的加工是在______等细胞器上进行的。人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是___________________。

Answer

（1）PCR 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 乳腺蛋白基因

（2）显微注射

（3）滋养层细胞 提高胚胎的利用率

（4）内质网、高尔基体（核糖体、线粒体不给分） 基因的选择性表达

【解析】

试题分析：（1）在体外扩增基因可以采用PCR技术。构建基因表达载体需要用限制酶对目的基因和运载体进行切割，然后用DNA连接酶进行连接，故是限制酶和DNA连接酶。要得到乳腺反应应将目的基因与乳腺蛋白质基因的启动子等调控软件重组在一起。

（2）将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵常用显微注射法。导入植物常用农杆菌转化法，导入微生物用钙离子处理。

（3）进行DNA分析应用囊胚期的滋养层细胞。囊胚期的细胞的内细胞具有全能性可以作为胚胎分割的时期，胚胎分割最大的优点是提高胚胎的利用率。

（4）胞外蛋白需要在内质网和高尔基体进行加工。而只在乳腺细胞中合成的原因是基因的选择性表达，在其它细胞中也有该基因，但不表达。

考点：本题考查基因工程和胚胎工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。