Question

为研究双氢青篙素（DHA）对人结肠癌HCT116细胞的作用，科研人员提出以下实验思路：

（1）取HCT116细胞用胰酶消化后，再用含血清的培养液制成细胞悬液，分别接种于4块培养板（一种多孔的细胞培养器具）的培养孔内，置于CO₂培养箱内培养12h。

（2）取出培养板，吸弃培养孔内上清液后向每孔中加入含有不同浓度DHA的培养液（浓度分别为0、125、250、500nmol/L），每个浓度加3个培养孔，置于培养箱内培养。其它培养板也做相同处理。

（3）分别于加药后12、24、48、72 h后，各取一块培养板，采用MTT检测法测定各孔内培养液的光吸收值（OD值），计算抑制率[抑制率=（1-加药组OD/对照组OD）×100%]。

（说明：MTT，即四唑氮蓝，它能被活细胞线粒体中一种与柠檬酸循环有关的酶还原成不溶于水的蓝紫色结晶，而死细胞中此酶无活性，不能产生蓝紫色结晶。故可经相关处理后测OD值反映细胞存活率和抑制率。）

请回答：

（1）实验目的是：   

（2）请设计一张表格用于记录实验时所测得的数据，便于抑制率的计算。

（3）实验中需要控制的无关变量有   （至少写出两个）。每个DHA浓度需加3个培养孔，是为了    。

（4）若最终的实验结果以坐标图呈现，则纵坐标应标识为      。

Answer

（1）探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用（探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制效应，其他合理答案也可）

（2）

（3）温度、培养液pH、细胞数、孔内添加培养液的量等 求平均值，减少实验误差

（4）抑制率

【解析】

试题分析：（1）分析给出的实验思路：该实验的自变量为不同浓度DHA的培养液和给药时间，因变量是检测人结肠癌HCT116细胞存活率和抑制率，据此可知该实验目的是：探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用。

（2）绘制表格时，第一行和第一列应分别为时间和DHA浓度（或者是DHA浓度和时间）；由题意“每个浓度加3个培养孔，分别于加药后12、24、48、72 h后采用MTT检测法测定”可知：每个浓度应分别在12、24、48、72 h记录4组OD值数据，即孔1、孔2、孔3及其平均值。详见答案。

（3）实验中需要控制的无关变量有温度、培养液pH、细胞数、孔内添加培养液的量等。每个DHA浓度需加3个培养孔，是为了求平均值，减少实验误差。

（4）由于实验目的是：探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用，检测的OD值能反映细胞存活率和抑制率，所以若最终的实验结果以坐标图呈现，则纵坐标应标识为抑制率。

考点：本题考查探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用的实验的相关知识，意在考查学生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力