Question

若要利用某目的基因（见图甲）和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA（见图丙），限制性核酸内切酶的酶切位点分别是Bgl Ⅱ（A^↓GATCT）、EcoR Ⅰ（G^↓AATTC）和Sau3A Ⅰ（^↓GATC）。下列分析合理的是（  ）

A．用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体

B．用Bgl Ⅱ和EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体

C．用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体

D．用EcoR Ⅰ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体

Answer

D

【解析】用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，产生相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接，故A错误；用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因切割目的基因会产生两种DNA片段，一种含有目的基因，一种不含目的基因，且有目的基因的片段与运载体结合时容易发生反向连接，故B错误；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，也能产生相同的黏性末端，可能会发生反向连接，故C错误；只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，产生不同的黏性末端，防止发生反向连接，这样目的基因插入运载体后，RNA聚合酶的移动方向肯定与图丙相同，故D正确．

【考点定位】基因工程的原理及技术

【名师点睛】分析题图：用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，产生相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接；用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因切割目的基因会产生两种DNA片段，一种含有目的基因，一种不含目的基因；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，也能产生相同的黏性末端，可能会发生反向连接；只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，产生不同的黏性末端，防止发生方向连接，这样目的基因插入运载体后，RNA聚合酶的移动方向肯定与图丙相同．