Question

苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题。

图1                                   图2

（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有________种DNA片段。过程②两片段通过________________键相连。

（2）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和Hind Ⅲ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamH Ⅰ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由__________________________。

（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒________。

A．既能被BamH Ⅰ也能被Hind Ⅲ切开        B．能被BamH Ⅰ但不能被Hind Ⅲ切开

C．既不能被BamH Ⅰ也不能被Hind Ⅲ切开    D．能被Hind Ⅲ但不能被BamH Ⅰ切开

（4）图2中α链是________。不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点________（在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是___________________________________________。

Answer

（1）4 磷酸二酯

（2）能，切割后露出的黏性末端相同

（3）D

（4）mRNA 不完全相同 不同组织细胞中基因会进行选择性表达

【解析】

（1）图中①的DNA含有两个BamHⅠ酶的切割位点，含有一个HindⅢ酶的切割位点，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反应管中有4种DNA片段．

（2）据图分析，由于BamHⅠ和BclⅠ切割DNA后露出的黏性末端相同，质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为限制酶BclⅠ的碱基序列，用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，用BamHⅠ和HindⅢ切割目的基因，仍能获得重组质粒．

（3）质粒和目的基因都被HindⅢ切割，形成相同的黏性末端，则形成的重组质粒还能被HindⅢ切割；质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，则形成的黏性末端是

T

ACTAG，而目的基因被BamHⅠ切割，则形成的黏性末端

G

CCTAG，

则形成的重组DNA片段是

TGATCC

ACTAGG，则不能被BamHⅠ识别，也不能切割．

根据酶切位点和识别的碱基序列可知，重组质粒只能被能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开．

（4）从图2可知，a链形成是以DNA一条链作为模板进行转录形成的信使RNA分子；不同组织细胞的相同DNA在转录时，如果是相同基因一般转录起点相同，不同的基因转录起点不同，原因是基因的选择性表达．

【考点定位】基因工程的原理及技术；遗传信息的转录和翻译

【名师点睛】1、由于HindⅢ与BamHⅠ两种限制酶酶切形成的黏性末端不一样，图中①中的DNA同时被这两种限制酶切割后产生四种基因片段，即_B、HB、BH、B_ （H表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）．

2、图2表示基因的表达，DNA转录形成信使RNA（α链），翻译形成多肽链．