下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，研究者需将该基因通过 （方法）注入到羊的 中，则发育成的羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。这一过程涉及到以下哪些过程（多选） 。
A．DNA自我复制B．DNA以其一条链为模板合成RNA
C．RNA自我复制D．按照RNA上密码子的排列顺序合成蛋白质
（2）若图2中目的基因D需要同时使用MetⅠ和PstⅠ才能获得，而图1所示的质粒无相应的限制酶酶切位点。所以在该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒改造，构建新的限制酶酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶酶切位点的思路（选填①-⑤）：
①EcoRⅠ②MetⅠ③PstⅠ④DNA连接酶⑤DNA聚合酶
首先用 处理质粒；然后用 处理质粒，使被切开的质粒末端连接上相应的脱氧核苷酸；再用 处理质粒，形成了的限制酶酶切割位点，它可被②识别。
（3）检测筛选是一个重要步骤。图3表示在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种方法与培养方法，以检测基因表达载体是否导入大肠杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有 。从筛选结果分析，含目的基因的是 （填编号）菌落中的细菌。
⑷DNA分子中，一条链的两个核苷酸通过 连接。如要检测目的基因是否成功表达，须提取培养后大肠杆菌解的 ，用相应抗体检测。
转基因抗虫棉是人们应用较早的基因工程推广项目，目前转基因技术有了新的改进，如图所示，请根据所学知识回答：
（1）构建相关的目的基因表达载体时，应该选择的限制酶是 ；如图，切割目的基因两侧序列和载体时用两种限制酶，相较使用同种限制酶而言，其优点是，在目的基因两侧和载体切口处可能形成不同的 ，不但可以防止切割下的基因和切开的载体分别发生 ，还可以避免前者在插入载体切口处时产生与表达载体转录方向 （填“相同”或“相反”）的连接。
（2）若目的基因最终整合到染色休上，则从棉株1、2、3中各随机取出一个叶肉细胞，其细胞核中含有的目的基因个数分别为 个。
（3）④过程通常采用 处理使染色体数恢复。取棉株2的两个体细胞融合也能得到符合生产要求的棉株3，其原理为 和 。
如图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定DNA的细菌克隆示意图，下列叙述正确的是（）
A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目
B．外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制
C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接
D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定DNA的细菌菌落位置
下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，有关的叙述中错误的是（）
A．基因工程的核心是基因表达载体的构建
B．可以利用人的皮肤细胞来完成①过程
C．过程②必需的酶是逆转录酶
D．在利用AB获得C的过程中，可以用同一种限制性核酸内切酶切割A和B，使它们产生形同的黏性末端
绿色荧光标记的X染色体DNA深针（X探针），仅能与细胞内的X染色体DNA的一段特定序列杂交，并使该处呈现绿色荧光亮点，同理，红色荧光标记的Y染色体的DNA探针（Y探针）可使Y染色体呈现一个红色荧光亮点，同时用这两种探针检测体细胞，可诊断性染色体数目是否存在异常，医院对某夫妇及其流产胎儿的体细胞进行检测，结果如图所示，下列分析正确的是（ ）
A．X染色体DNA上必定有一段与X探针相同的碱基序列
B．据图分析可知妻子患X染色体伴性遗传病
C．妻子的父母至少有一方患有性染色体数目异常疾病
D．该夫妇选择生女儿可避免性染色体数目异常疾病的发生
小香猪的体色由黑色变为白色是细胞核中某基因发生碱基对改变，导致所编码的蛋白质中一个氨基酸被替换的结果，下列各项中也会发生改变的是（ ）
A．该基因在染色体上的位置
B．rRNA的碱基排列顺序
C．所编码蛋白质的肽键数目
D．该基因的基因频率
