Question

降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图:

获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点—G^↓AATTC—）和BamHⅠ（识别序列和切割位点—G^↓GATCC—）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中。下列有关分析错误的是（   ）

A．Klenow酶是一种DNA聚合酶

B．合成的双链DNA有72个碱基对

C．EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是保证目的基因和运载体的定向连接

D．筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因

Answer

B

【解析】根据题意“两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA”可知Klenow酶是以DNA单链为模板，使子链延长的DNA聚合酶，A正确；根据“人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段”可推出合成的DNA双链碱基对是72×2-18=126个碱基对，B错误；用不同的酶切可以产生不同的黏性末端，有利于目的基因和运载体的定向连接，C正确；筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因，D正确。

【考点定位】基因工程的原理及技术

【名师点睛】技能点拨：图为人工合成的方法获取目的基因，观察图可以发现通过Klenow酶能够将单链DNA延伸，并且中间形成18个碱基对，则两侧分别有（72-18）=54个碱基．由于EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列和切点不同，所以用EcoRⅠ和BamHⅠ同时切割，目的基因两侧形成的黏性末端不同，载体也是，这样可以保证目的基因和载体定向连接，形成重组质粒。