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内皮素(ET)是一种多肽,它有强烈血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,研究发现内...

内皮素ET是一种多肽,它有强烈血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用,研究发现内皮素功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联内皮素主要通过靶细胞膜上内皮素受体而发挥生物学效应。ETA是内皮素主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA在细胞中髙效表达,为后期体外研究以及拮抗剂筛选、活性评价等奠定基础。其过程如下图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaI识别序列为CCCGGG,限制酶XhoI识别序列为CTCGAG。请分析回答:

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1完成过程①、④所需酶分别是            ,过程②相比,过程①特有碱基配对方式是        

2过程③中,限制酶Xho I切割DNA,使        键断开,形成的黏性末端是             ,与只使用限制酶XhoI相比,用两种限制酶切割获得的优点在于:既能防止              ,还能保证目的基因定向连接到载体上。

3过程⑥中,要用            预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA感受态。

4基因工程的核心是图中过程              填标号,重组质粒中氨苄青霉素抗性基因的作用是     ;利用SNAP与因结合构成融合基因,目的是可以检测               

5人皮肤黑色素细胞上有内皮素特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上受体后,会刺激黑色素细胞分化、增殖并激活酪氨酸酶活性,从而使黑色素急剧增加,美容时可以注射ETA达到美白祛斑效果,原因是ETA与内皮素结合,               ,抑制了黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。

 

(1)逆转录酶、DNA连接酶 U—A (2)磷酸二酯键- AGCT(或-C-GAGCT) 含目的基因的DNA片段和质粒自身环化 (3)Ca2+(CaCl2) (4)④ 将含有目的基因的细胞筛选出来 检测ETA基因能否表达及表达量 (5)减少内皮素与黑色素细胞膜上受体的结合 【解析】 试题分析:(1)图中1过程是逆转录过程,需要逆转录酶的催化;与过程2相比,该过程特有的碱基配对方式是U-A。 (2)限制酶Xho I切割DNA,使磷酸二酯键断开,由于限制酶XhoⅠ的识别序列为C↓TCGAG,因此其切割形成的黏性末端是-AGCT,EcoRI和XhoI切割形成的黏性末端不同,而DNA连接酶只能将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来,因此为了防止目的基因反向粘连和质粒自行环化,酶切时可选用的酶是EcoRI和XhoI,提高连接成功率 (3)过程6重组质粒导入受体细胞的过程,要用Ca2+(或CaCl2)预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA的感受态。 (4)基因工程的核心是构建重组质粒,是图中过程④,重组质粒中氨苄青霉素抗性基因的作用是将含有目的基因的细胞筛选出来。利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,可以检测ETA基因能否表达及表达量。 (5)ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合,抑制了内皮素对黑色素细胞的增值和黑色素的形成,从而达到美容的目的。 考点:基因工程的原理及技术  
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考点分析:
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下图为纯种荷斯坦奶牛的繁殖过程,据图回答下列问题:

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1克隆动物培养过程与图示繁殖过程相比特有的技术手段是         技术,这两种繁殖动物的方式相比,实质性的区别为前者是          生殖,后者是            生殖。

2—般用          激素对供体母牛做超数排卵处理。用激素对受体牛做           处理,以利于胚胎移植。

3受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需要添加维生素、          、氨基酸、核苷酸以及血淸等物质。

4上述纯种荷斯坦奶牛繁育成功原因之一:纯种荷斯坦奶牛胚胎可与受体黄牛的子宫建立         ,但是移入受体的供体胚貽的           在孕育过程中不受任何影响。              是胚胎工程其他技术的最后一道“工序”。

5某研究所决定培养转基因荷斯坦奶牛,科研人员先构建含药用蛋白基因的表达载体:再将其导入受精卵中:然后还要采用        技术检测转基因荷斯坦奶牛的DNA上是否插入了药用蛋白基因。

 

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下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图,据图回答下列问题:

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1图中向小鼠注射含多种抗原决定簇的抗癍后,所获得的兔疫抗血清实际上是含有         填写抗体的名称的混合物,这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低,而且纯度低。与多克隆抗体相比,单克隆抗体突出的优点在于它的                ,并能大量制备。

2图中选用B细胞和骨髄瘤细胞融合成杂交瘤细胞,如果仅考虑细胞的两两融合,其融合细胞有      种类型。

⑶图中两次筛选的目的不同,其中筛选①的目的是筛选出            细胞,筛选时所用的培养基是特定的          培养基。筛选②的目的是筛选出            细胞。

4科学工作者正在研究的用于治疗癌症的“生物导弹”,注入体内,借助单克隆抗体的导向作用,将

    定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。用“生物导弹”治疗癌症和普通化疗相比优点是         

5由图中可看出,单克隆抗体的制备过程中,运用了动物细胞工程中的                 两大技术。

 

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请回答下列有关现代生物科技的问題:

1人体器官移植面临的主要问題是        和兔疫排斥等。通过对患者的EK细胞进行诱导,可培育出特定人造组织器官。EK细胞来源于        或原始性腺,也可以通过         技术得到重组细胞后再进行相应处理获得。

2人们发现小型猪的器官可用来替代人体器官进行移植,但小型猪器官表面的某些抗原仍可引起免疫排斥。目前科学家正试图利用基因工程对小型猪的器官进行改造,即导入小型猪基因组中一些调节因子,这些调节因子在基因工程中被称为              ,其作用是                       

3蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程,其过程是:预期蛋白质         →设计预期的蛋白质         →推测应有的         序列→找到相对应的核苷酸序列。

⑷一般来说,生态工程的主要任务是对已被破坏的        进行修复,对造成环境污染和破坏的       进行改善,并提高生态系统的生产力。

 

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科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄一马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如图所示。

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1植物体细胞杂交依据的生物学原理有            

2过程①常用的方法是               ,细胞融合完成的标志是                  

3植物原生质体融合过程常利用化学试剂            诱导融合,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,当观察到融合的细胞表面            ,可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。

4过程③和过程④依次为          ,过程④中的培养基常添加的植物檄素有             

5若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞中含n条染色体,则“番茄一马钤薯”细胞在有丝分裂后期含   条染色体。若杂种细胞培育成的“番茄一马铃薯”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于             植株。

 

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天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列有关操作正确的是 

A提取开蓝花矮牵牛的叶肉细胞的mRNA,经逆转录获得DNA,再经PCR技术扩增基因B

B可以根据目的基因的有关信息从开蓝色花的矮牵牛的基因文库中获得基因B

C利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞

D将含基因B的基因表达载体导入大肠杆菌,使之感染并转入玫瑰细胞

 

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