动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
(1)肝脏切成小薄片,这有利于肝脏细胞 。
(2)气室中充入5% C02气体的主要作用是 。
(3)培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长,但要注意选择抗生素的 ,以保证抗生素对肝脏无害。
(4)有机物X有毒性,可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具,探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。
材料用具:肝脏小块,外周血淋巴细胞,淋巴细胞培养液,植物凝集素(刺激淋巴细胞分裂);显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,滴管;吉姆萨染液(使染色体着色),有机物X溶液等。
实验过程:
①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞,取4等份,备用。
②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置,按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)。
| 甲 | 乙 | 丙 | 丁 |
步骤一:加人肝脏培养液 | √ | √ | √ | √ |
步骤二:加入有机物X溶液 | √ |
| √ |
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步骤三:放置肝脏小块 | √ |
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上表中还需进行的操作是 。
③培养一段时间后,取4组装置中的等量培养液,分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。
④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ,并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常,而甲组的淋巴细胞正常,则说明 。
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1) 技术和 技术是获得单克隆抗体的基础。
(2)图中A过程是从小鼠的脾脏中取得 细胞,该细胞能够产生 。从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射 类物质。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比。最大的优越性是 。
(4)制备过程中,第二次筛选的目的是 。
(5)杂交瘤细胞体外培养过程中,为避免毒害,常采取的措施是 。
(6)如果破坏杂交瘤细胞中的核仁,抗体合成将不能进行,因该结构与 的形成有关。
在20世纪初,科学家用植物细胞杂交方法,将白菜的原生质体和甘蓝的原生质体融合,成功地培育出了“白菜﹣甘蓝”杂种植株,据图回答下列问题:
(1)过程b完成的标志是__________。要促进杂种细胞的分裂生长,培养基中应有营养物质和激素,其中激素包括_____和_____两类植物激素。
(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中,依据的原理是_________,c涉及的分裂方式为___________________。
(3)若白菜细胞内有m条染色体,甘蓝细胞含n条染色体,则“白菜﹣甘蓝”细胞内含____条染色体;若杂种细胞培育成为“白菜﹣甘蓝”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株?__________。
(4)要制备“白菜﹣甘蓝”人工种子,要选取具有生根发芽能力的__________(结构),包裹上人工种皮制得。
下图是植物细胞杂交过程示意图,请据图回答:
(1)植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是 法,也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。
(2)②过程的发生必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的原理是 ,常用的化学方法是用 试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同,诱导融合的方法类似,动物细胞的融合还常用到 作为诱导剂。
(3)与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为 。
(4)④过程称为 ,⑤过程称为 。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇,培养将进行到 (填字母编号)即可。
(5)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值,其突出的优点是可以 。
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有_ __、 ____个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越__________。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割的原因_______ _____。
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________________________
(5)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在_________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(6)基因工程中利用乳腺生物反应器生产-抗胰蛋白酶,应选用__________切割含有目的基因的DNA片段和载体,并用__________方法导入__________中,再利用SRY探针 (Y染色体上的性别决定基因)进行检测,将检测反应呈________(选填“阳”、“阴”)性的胚胎进行移植培养。
为增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连,导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。
(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物,采用 技术从陆地棉基因文库中获取酶
D基因,从拟南芥基因文库中获取转运肽基因,所含三种限制酶(ClaI、SacI、XbaI)的切
点如下图所示。则用 和 酶处理两个基因后,可得到 端与
端(填图中字母)相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入右上图所示Ti质粒的T-DNA中,构建 并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含 的固体培养基上培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基震荡培养,可以得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是 。
(4)进一步筛选后获得转基因油菜细胞,该细胞通过 技术,可培育成转基因油菜植株。用 法在分子水平上可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。