Question

甲醛是一种来源广泛的挥发性有机污染物，具有强烈的致癌和促癌作用，利用微生物降解甲醛来治理甲醛污染，具有高效、环保、无二次污染等优点。下图甲为采集活性污泥作为优良菌源。通过驯化分离筛选出能以甲醛为唯一碳源和能源的高效降解菌的实验过程。请分析回答：

(1)实验中震荡的目的是________，③过程获得了以甲醛为唯一碳源的细菌，所加的甲醛的作用是             和               。上述实验材料中，不需要进行灭菌处理的是             ，培养基灭菌的常用方法为              。

(2)由③→④的接种方法为平板划线法如图乙所示，此处通过接种环在无机固体培养基表面连续划线，操作的目的是将聚集的菌种逐步_________到培养基的表面，通过培养能获得单个菌落。图乙表示在平板培养基上的第一次和第二次划线，请在图丙中画出第三次划线；划线后在恒温培养箱中培养时，培养皿倒置的原因是                。

(3)为研究甲醛初始浓度对菌株降解甲醛能力的影响，进行了相应实验。当甲醛的初始浓度小于1200 mg／L时，菌株可以完全降解甲醛；当甲醛的初始浓度增高至1600 mg／L时，48小时后菌株对甲醛的降解能力很弱，甚至失去降解能力，其原因可能是                                  。为了使该实验所得结果准确可靠，还应该设置                             的对照实验，以排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰。

Answer

（1）使微生物和培养基充分接触，增加溶氧量 提供碳源、抑制其他微生物的生长 活性污泥 高压蒸汽灭菌法

（2）稀释分散 第三次划线如下图 避免培养皿盖的冷凝水滴入培养基，保持培养基的干燥

（3）甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性，从而降低了细菌降解甲醛的能力（或甲醛浓度过高会产生毒害作用，降低了细菌降解甲醛的能力） 不接种甲醛降解菌

【解析】

（1）震荡培养液可以使微生物和培养基充分接触，提高营养物质利用率，同时能够增加溶氧量。③过程甲醛是唯一碳源， 同时可以抑制其他微生物的生长。培养用具和培养基需要灭菌处理，活性淤泥不能进行灭菌，否则甲烷降解菌也会被杀死。培养基常用高压蒸汽法进行灭菌。

（2）连续划线可以将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。在恒温培养箱中培养时，培养皿倒置的原因是避免培养皿盖的冷凝水滴入培养基，保持培养基的干燥。

（3）甲醛浓度过高会使菌体蛋白质变性，降低细菌降解甲醛的能力。排除甲醛自然挥发对实验结果的干扰，应设置不接种甲醛降解菌的对照实验。