Question

下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是（  ）

A．a通常存在于细菌体内，目前尚未发现真核生物体内有类似的结构

B．b识别特定的核苷酸序列，并将A与T之间的氢键切开

C．c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对

D．若要获得真核生物的d，则一般采用人工合成方法

Answer

D

【解析】

试题分析：a为质粒，通常存在于细菌体内，但是真核生物酵母菌也有质粒，A错误；b为限制性核酸内切酶，识别特定的核苷酸序列并在特定的位点进行切割，切割的是DNA两条链上的磷酸二酯键，而不是氢键，B错误；C为DNA连接酶，主要作用是将目的基因和质粒间露出来的粘性末端或平末端连接起来，连接的是磷酸二酯键，而不是碱基对间的氢键，C错误；d为目的基因，其获取方法有鸟枪法、人工合成法等．若要获得真核生物的d，则一般采用人工合成方法；若d的基因序列未知，可从基因文库获，D正确。

考点：基因工程的原理及技术

【名师点睛】基因工程的基本工具

1、“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的．

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性．

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端．

2、“分子缝合针”--DNA连接酶

（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合磷酸二酯键．

②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低．

（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键．

3、“分子运输车”--载体

（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存．

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．

（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子．

（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。