Question

苦荞富含黄酮类化合物等营养物质，在降血糖、降血脂等方面功效显著。查尔酮合成酶（CHS） 是黄酮类化合物合成的关键酶，下图为将CHS基因导入苦荞，培育髙产黄酮苦荞品系示意图。

（1）基因工程的核心是                        。

（2）可利用      、        方法获取CHS基因。

（3）过程①中切开质粒的酶是           。它能在质粒特定的部位切割的原因是                     。

（4）过程②、③分别是        。苦荞细胞能培养成植株的根本原因是                          。

（5）为培育转基因苦荞植物，还可将该植物幼叶消毒后，用      酶混合液处理，获得了原生质体。酶混合液中含有适宜浓度的甘露醇，其作用是            。将目的基因导入到原生质体，经培养形成愈伤组织，再通过       得到分散的胚性细胞，发育成     ,生长发育后获得该转基因植株。

（6）愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力，下列原因错误的是        。（填选项编号）

A．愈伤组织发生遗传变异

B．愈伤组织不能分散成单细胞

C．愈伤组织中激素平衡发生改变

D．愈伤组织对外源激素敏感性发生改变

Answer

（1）构建重组DNA分子

（2）从基因文库获取、化学方法合成成PCR合成

（3）限制性核酸内切酶（限制酶） 能识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割DNA分子

（4）脱分化、再分化 植物细胞的全能性（细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因）

（5）纤维素酶和果胶酶（写全才得分）维持滲透压 液体悬浮培养 胚状体

（6）B

【解析】

试题分析：（1）基因工程的核心是构建基因表达载体（即重组DNA分子）。

（2）获取目的基因的方法有：从基因文库获取、化学方法合成成PCR合成。

（3）过程①中切开质粒的酶是限制性核酸内切酶（限制酶），它能在质粒特定的部位切割的原因是限制酶能识别特定的核苷酸序列并在特定的切点上切割双链DNA分子。

（4）过程②是脱分化形成愈伤组织，过程③是再分化形成试管苗。苦荞细胞能培养成植株的根本原因是植物细胞的全能性（细胞中含有发育成完整个体所必需的全部基因）。

（5）由植物细胞获得原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。处理过程中酶混合液中含有适宜浓度的甘露醇，其作用是维持渗透压，防止原生质体被过度吸水或者失水死亡。将目的基因导入到原生质体，经培养形成愈伤组织，再通过液体悬浮培养得到分散的胚性细胞，发育成胚状体,生长发育后获得该转基因植株。

（6）愈伤组织继代次数过多会丧失细胞全能性的表达能力，可能的原因有愈伤组织发生遗传变异，愈伤组织中激素平衡发生改变，愈伤组织对外源激素敏感性发生改变等，所以本题选B。

考点：基因工程和植物组织培养的相关知识