Question

利用小鼠制备抗羊红细胞的单克隆抗体，回答下列有关问题：

（1）取相应B细胞前必需先给小鼠注射            ，形象地说先“打针”，否则失败。

（2）诱导融合的两种细胞名称及作用：                  ——产生抗体；骨髓瘤细胞一一             。

（3）诱导融合与原生质融合的不同方法：                     。

（4）两次筛选的目的及方法：

①在特定的            培养基上，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的              细胞才能生长。

②经①筛选后的细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，需经           培养和             检测，经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

（5）两种培养提取场所：

①体外培养一一细胞培养液提取。

②体内小鼠腹腔中培养一一小鼠腹水中提取。

（6）优点：             强，             高，并可大量制备。

Answer

（1）羊红细胞

（2）免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）；大量增殖

（3）灭活病毒诱导

（4）①选择性；杂交瘤细胞 ②克隆化； 抗体

（6）特异性；灵敏度

【解析】

试题分析：（1）制备抗羊红细胞的单克隆抗体，所以要先给小鼠注射羊红细胞，然后从小鼠脾脏获得相应的B细胞。

（2）由（1）分析可知，从小鼠脾脏获得相应的免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）和小鼠的骨髓瘤细胞，前者能够合成和分泌抗体，后者能够大量增殖。

（3）原生质体融合的方法是物理法（电激、振动等）和化学法（聚乙二醇），而诱导动物细胞融合除了可以用原生质体融合的方法，还可以用灭活的病毒诱导。

（4）两次筛选的目的及方法：

①在特定的选择培养基上，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。

②经①筛选后的细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，需经克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

（6）优点：特异性强，灵敏度高，并可大量制备。

考点：细胞融合与单克隆抗体

【名师点睛】单克隆抗体制备过程的几个问题分析

（1）对动物免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。

（2）在单克隆抗体制备过程中，一般认为有两次筛选过程，第一次是筛选出杂交瘤细胞（用选择培养基），第二次是进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞。

（3）杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质，不仅具有浆细胞产生特异性抗体的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力，从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点，而大量生产单克隆抗体。