Question

[生物——选修3：现代生物科技专题]

细胞工程可分为植物细胞工程和动物细胞工程等，请回答下列关于细胞工程的问题：

（1）图1所示为植物体细胞杂交的流程。图1中“去壁”要使用的酶是_________________；①过程常用的方法有物理法和化学法，物理法包括____________等；③过程和④过程分别表示______________。

（2）图2所示为制备单克隆抗体的流程。图中“筛选”包括选择培养和抗体阳性检测，其中能在特定的选择培养基中存活的是_______________，而抗体阳性检测的目的是____________。 

（3）图2中，促进细胞融合的方法中，不同于图1中促进细胞融合所涉及的方法是_______________；筛选中的目标细胞还可以注射到小鼠腹腔内增殖，从_______________中提取单克隆抗体。与普通抗体相比，单克隆抗体具有______________等优点。

Answer

（1）纤维素酶和果胶酶 离心、振动、电激 脱分化和再分化

（2）杂交瘤细胞（1分） 筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞

（3）灭活病毒法 小鼠的腹水 特异性强、灵敏度高、并可能大量制备

【解析】（1）图1中“去壁”要使用的酶是纤维素酶和果胶酶，作用是去除植物的细胞壁。①过程是诱导原生质体融合，采用的方法有物理法和化学法，其中物理法包括离心、振动和电激等。由图1可知，过程③是使杂种细胞形成愈伤组织，过程④是使愈伤组织形成杂种植株，由此推测，③是脱分化、④是再分化。

（2）单克隆抗体的制备过程中要进行2次“筛选”，第1次“筛选”是在选择培养基上获得杂交瘤细胞，第2次“筛选”是经过抗体阳性检测后获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。

（3）单克隆抗体的制备过程中，需要使小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，采用的方法有物理法、化学法和灭活的病毒法。其中不同于植物体细胞杂交技术的方法是灭活的病毒法；筛选出的目标细胞还可以注射到小鼠腹腔内增殖，从小鼠的腹水中提取单克隆抗体。与普通抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、并可能大量制备等优点。

【考点定位】植物的组织培养；细胞融合与单克隆抗体

【名师点睛】技法提炼

一、植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法

（1）诱导产物（假设用于杂交的两种植物细胞分别为A、B）：

①未融合的细胞：A和B。

②两两融合的细胞：AA、BB和AB。

③多细胞融合体。

（2）检测方法：对诱导产物中的细胞进行植物组织培养，然后根据得到的植物性状进行判断。

①若只表现出一种植物的性状，说明是未融合细胞。

②若得到的是具有两种亲本性状的植物，说明是杂种植株。

③若得到的是两种亲本性状的植物，且一种植物的性状得到加强，则是多细胞融合体。

④若得到的是一种植物的性状，但是效果得到加强，则是同种细胞融合的结果。

二、单克隆抗体制备过程的几个问题分析

（1）对动物免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。

（2）在单克隆抗体制备过程中，一般认为有两次筛选过程，第一次是筛选出杂交瘤细胞（用选择培养基），第二次是进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞。

（3）杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质，不仅具有浆细胞产生特异性抗体的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力，从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点，而大量生产单克隆抗体。