Question

在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里,一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β胡萝卜素,它呈现金黄色泽,故称“金色大米”。“金色大米”的培育流程如图所示,请回答下列问题。（已知酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—）。

（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中,其核心是       ,通过该操作形成了图中的        （填字母）,它的构成至少包括         等。

（2）在研究过程中获取了目的基因后采用        技术进行扩增。在构建c的过程中目的基因用        （填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”）进行了切割。检验重组载体导入能否成功,需要利用         作为标记基因。

（3）过程d通常采用            法,过程e运用了            技术,在该技术应用的过程中,关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行           和           。

Answer

（1）基因表达载体的构建 c 目的基因、启动子、终止子、标记基因

（2）PCR 限制酶Ⅱ 基因I

（3）农杆菌转化 植物组织培养 脱分化 再分化

【解析】

试题分析：（1）培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是基因表达载体的构建。通过该操作形成了图中的c重组质粒，它的构成至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等。

（2）在研究过程中获取了目的基因后采用PCR技术进行扩增。据图分析，目的基因的两侧有-GGATCC-、-GATC-两种序列，由于酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，因此只能选择限制酶Ⅱ获取目的基因。图中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此检验重组载体导入能否成功，需要利用基因Ⅰ作为标记基因。

（3）过程d通常采用农杆菌转化法，过程e将水稻细胞培养成完整植株运用了细胞工程中的植物组织培养技术，在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成植株。

考点：基因工程的原理及技术