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[生物--选修1:生物技术实践]

某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

KH2PO4

Na2HPO4

MgSO4·7H2O

蛋白胨

葡萄糖

尿素

琼脂

14g

21g

02g

10g

100g

10g

150g

1根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____能/不能,原因是__________________。

2培养基用___________方法灭菌,培养皿用__________方法灭菌,待培养基冷却到___________℃左右时,在_____附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止________,以免造成污染。

3要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用_________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的___________就能大约推测出样品中活菌数。

4培养分解尿素的细菌时,需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

5实验中使用过的培养基及其培养物必须经过___________处理后才能丢弃,以防止微生物的扩散。

 

(1)不能 培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(培养基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素)(2分) (2)高压蒸汽灭菌 干热灭菌 50 酒精灯火焰 培养皿盖上的水珠落入培养基(2分) (3)(稀释)涂布平板(2分) 菌落数目 (4)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(2分) (5)灭菌 【解析】(1)据表分析,表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源,所以不能分离尿素分解菌,筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一的碳源的选择培养基. (2)微生物培养中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌,玻璃器皿可以使用干热灭菌.倒平板时需要培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰旁进行,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染. (3)固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法,稀释涂布平板法适用于微生物的统计计数,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数目/平均菌落数能够推测样品中的活菌数. (4)检测培养基是否被污染,需要将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,如果有菌落数目被污染,否则没有被污染. (5)为防止微生物污染环境和操作者,实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌后倒掉. 【考点定位】微生物的分离和培养  
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性状

等位基因

显性

隐性

种子的形状

A-a

圆粒

邹粒

茎的高度

B-b

高茎

矮茎

子叶的颜色

C-c

黄色

绿色

种皮的颜色

D-d

灰色

白色

豆荚的形状

E-e

饱满

不饱满

豆荚的颜色未成熟

F-f

绿色

黄色

花的位置

G-g

腋生

顶生

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材料

叶绿素

a/b

类胡萝卜素/叶绿素

净光合速率

µmolCO2·m-2·s-1

胞间CO2浓度

µmolCO2·m-2·s-1

呼吸速率

µmolCO2·m-2·s-1

突变体

930

032

566

23907

360

野生型

694

028

813

21086

407

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