Question

食品工业上常用新鲜苹果榨取果汁，再接种酵母菌来制作高品质果酒，简要流程如下：

（1）为获得纯度较高的菌种，在分离和培养酵母菌时，需要进行__________操作。扩大培养时，使用的培养基是__________（填“固体”或“液体”）培养基，并需要提供________（填“有氧”或“无氧”）条件。

（2）在果汁中加入适量 _____________，可以加速苹果汁的出汁速率，缩短操作的时间。

（3）在酸性条件下，可用_____________来检测发酵产物中是否有酒精产生。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用_____________法，但此种方法最终计算得出菌体数目往往比实际的数目低，原因_____________。

（4）由于封口不严，某瓶果酒放置一段时间后，发现带有明显的酸味，使果酒变酸的主要微生物是_______。

Answer

（1）无菌 液体 有氧

（2）果胶酶

（3）重铬酸钾 稀释涂布平板 两个或多个细胞相连时,会被统计成一个菌落

（4）醋酸菌

【解析】（1）为获得纯度较高的菌种，在分离和培养酵母菌时，需要进行无菌操作，培养酵母菌时，使用的培养基为液体培养基，由于酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸，能大量增殖因此扩大培养需要提供有氧条件。

（2）植物细胞的细胞壁成分是纤维素和果胶，因此可以在果汁中添加果胶酶来提高出汁率。

（3）酒精可用酸性条件下的重铬酸钾溶液来检测；若要进一步检测果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用稀释涂布平板法；这种方法计算得到的数值往往偏低，原因是两个或多个酵母菌会形成一个菌落。

（4）由于封口不严，放置一段时间，醋酸菌会进入培养瓶，在有氧条件下把乙醇氧化成乙酸。

【考点定位】酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；微生物的分离和培养

【名师点睛】灭菌一般包括干热灭菌和湿热灭菌，干热灭菌就是指在干燥条件下的灭菌，一般用于玻璃器皿和手术器戒的灭菌；湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，以高温高压水蒸气为介质，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，最终导致微生物的死亡。

果胶会影响出汁率，还会使得果汁浑浊，果胶酶能分解果胶，瓦解植物细胞壁以及胞间层，使得榨取果汁更容易，而且使得果汁变得澄清。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养；在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。