Question

如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库          基因组文库（选填“大于”或“等于”或“小于”）。

（2）①过程提取的DNA需要          的切割，B过程是              过程。

（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是        ，其原理是                 。

（4）目的基因获取之后，需要进行             ,其组成必须有              及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。

（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是            ，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是             ，可以用                 技术进行检测。

Answer

（1）小于（1分） （2）限制酶（1分） 反转录（1分）

（3）PCR技术（1分） DNA分子的半保留复制

（4）基因表达载体的构建 启动子、终止子、目的基因（复制原点可不答）

（5）土壤农杆菌转化法 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上 DNA分子杂交（1分）

【解析】（1）基因组文库包含某种生物所有的基因．部分基因文库包含某种生物的部分基因．如：cDNA文库．

（2）①过程是获取目的基因，需要限制酶切割．B过程是有mRNA获取DNA过程，是反转录过程．

（3）PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制．

（4）基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．

（5）受体细胞是双子叶植物，常用农杆菌转化法将目的基因转入到受体细胞中，利用农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上，能否转化成功，还需要用DNA分子杂交技术对受体细胞中DNA进行检测．

【考点定位】基因工程的原理及技术．

【名师点睛】1、基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因．包括基因组文库（包含某种生物所有的基因）和部分基因文库（包含某种生物的部分基因，如cDNA文库）．

2、PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）．PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制，需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），以指数的方式扩增，即约2n．

3、基因表达载体的构建是基因工程的核心．目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．