Question

苏云金杆菌能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图，据图回答下列问题。

（1）将图中①的DNA和质粒用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，过程②需要用到         酶。

（2）假设图中质粒上BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，那么该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割吗？    （填“能”或“不能”）。若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒__________（填“能”或“不能”）被BamHⅠ切开，_________（填“能”或“不能”）被HindⅢ切开。

（3）实际操作中最常用_____________法来获得转基因植物，种植转基因植物，它所携带的目的基因可能传递给非转基因植物，造成基因污染，把目的基因导入植物的_______DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是_______________。

Answer

（1）DNA连接酶

（2）能 能 不能

（3）农杆菌转化法 叶绿体（线粒体/细胞质） 叶绿体（线粒体/细胞质）中的基因不会通过花粉传给下一代

【解析】（1）由题意可知过程②是构建基因表达载体，要将目的基因和运载体相连，所以应用DNA连接酶。

（2）由酶切位点识别序列可知BclI切割后会产生-GATC的黏性末端，能和BamHI切割的黏性末端进行配对，所以能。该重组质粒连接后仍然是GGATCC，所以能被BamHI切开。但不能再被HindIII切开。

（3）实际操作中最常用农杆菌转化法来获得转基因植物，要防止基因污染应将目的基因导入到植物的线粒体或叶绿体的DNA中，因为受精时只有精子的细胞核与卵细胞结合，所以这样就不会通过花粉传递给下一代。

【考点定位】本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

【名师点睛】易错警示 巧辨基因工程操作基本工具的8个易错点

（1）限制酶是一类酶，而不是一种酶。

（2）限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。

（3）在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。

（4）将一个基因从DNA分子上切割下来，需要切两处，同时产生4个黏性末端。

（5）不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个DNA分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。

（6）限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便进行检测。

（7）基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体是DNA分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。

（8）基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。