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内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体...

内皮素ET是一种含21个氨基酸的多肽。内皮素主要通过与靶细胞膜上的内皮素受体结合而发挥生物学效应。ETA是内皮素的主要受体,科研人员试图通过构建表达载体,实现ETA基因在细胞中高效表达,为后期ETA的体外研究奠定基础。其过程如下图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因,限制酶ApaⅠ的识别序列为CCCGGG,限制酶XhoⅠ的识别序列为CTCGAG。请分析回答:

1完成过程①需要的酶是____________;

2过程③中,限制酶XhoⅠ切割DNA,使__________键断开,形成的黏性末端是__________________。用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是____________________。

3过程中需要         酶,去构建重组质粒。过程⑥中,要用__________预先处理大肠杆菌,使其处于容易吸收外界DNA。

4利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,目的是_____________。

5人皮肤黑色素细胞上有内皮素的特异受体,内皮素与黑色素细胞膜上的受体结合后,会刺激黑色素细胞的分化、增殖并激活酪氨酸酶的活性,从而使黑色素急剧增加。美容时可以利用注射ETA达到美白祛斑效果,试解释原因:______抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成。

 

(1)逆转录酶 (2)磷酸二酯 —AGCT(或—C—GAGCT) 可以使目的基因定向连接到载体上 (3)DNA连接酶 Ca2+(或CaCl2) (4)检测ETA基因能否表达及表达量 (5)ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合 【解析】(1)图中过程①是逆转录,需要逆转录酶的催化。 (2)限制酶能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定脱氧核苷酸之间切断磷酸二酯键;根据题意可知限制酶XhoⅠ切割DNA形成的黏性末端是—AGCT(或—C —GAGCT);用两种限制酶切割,获得不同的黏性末端,其主要目的是可以使目的基因定向连接到载体上(或防止含目的基因的外源DNA片段和质粒自身环化)。 (3)过程④是将目的基因与质量连接构建基因表达载体,需要DNA连接酶催化;过程⑥中,要用CaCl2预先处理大肠杆菌,使其成为处于容易吸收外界DNA的感受态的细胞。 (4)利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因,可以检测ETA基因能否表达及表达量。 (5)注射的ETA能与内皮素结合,减少了内皮素与黑色素细胞膜上内皮素受体的结合,抑制了内皮素对黑色素细胞的增殖和黑色素的形成,从而达到美容的目的。 【考点定位】基因工程的原理及技术  
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考点分析:
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下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。请据图回答下列问题。

1请将图1中的实验流程补充完整。

2冲洗的主要目的是______,冲洗应特别注意不能______,以防止菌种的流失。

3图2中的充气口在______时关闭,在______时连接充气泵,并不断向内______。

4排气口在果酒发酵时排出的气体是由______产生的______,在果醋发酵时排出的是__________________。

5从细胞核的构造看,酵母菌属于______生物,醋酸菌属于______生物。用____________染液使染色体着色,发现一个酵母菌细胞核中有17条染色体,该酵母菌是______倍体。

6葡萄酒呈现红色的原因是_____________,重铬酸钾在酸性条件下与酒精的颜色反应为______色。

 

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回答下列有关遗传变异问题。

斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具有纯合突变基因dd的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白G基因整合到斑马鱼17号染色体上,带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表示为g,用个体M和N进行如下杂交实验。

1根据上述杂交实验推测:亲代M的基因型是           ,子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括                 

2杂交后,出现红•绿荧光既有红色又有绿色荧光胚胎的原因是亲代           填“M”或“N”的初级精母细胞在减数分裂过程中,同源染色体的            发生了交换,导致染色体上的基因重组。

 

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中心法则揭示了生物遗传信息由DNA向蛋白质传递与表达的过程。请回答下列问题

1a、b、c、d所表示的四个过程依次分别是                     

2需要tRNA和核糖体同时参与的过程是        用图中的字母回答

3a过程发生在真核细胞分裂的      期。

4参与此过程的RNA种类有:                   

5在真核细胞中,a和b两个过程发生的主要场所是              

6能特异性识别信使RNA上密码子的分子是          ,后者所携带的分子是       

7RNA病毒的遗传信息传递与表达的途径有用类似本题图中的形式表述

                  ;②                   

 

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多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开,每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子。这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子,进行了下面的实验:

步骤①:获取该基因的双链DNA片段及其mRNA;

步骤②:加热DNA双链使之成为单链,并与步骤①所获得的mRNA按照碱基配对原则形成双链分子;

步骤③:制片、染色、电镜观察,可观察到图中结果。请回答:

1图中凸环形成的原因是             ,说明该基因有     个内含子。

2如果现将步骤①所获得的mRNA逆转录得到DNA单链,然后该DNA单链与步骤②中的单链DNA之一按照碱基配对原则形成双链分子,理论上也能观察到凸环,其原因是逆转录得到的DNA单链中不含有____________序列。DNA与mRNA形成的双链分子中碱基配对类型有      种,分别是            

 

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胰液分泌的调节是一个复杂的过程,下图为胰液分泌调节的部分示意图。请据图回答有关问题:

1从功能上看,神经A属于         神经。神经元接受刺激后产生局部电流,其作用是____________。

2当食物进入胃内后,引起胰液分泌增加的调节方式包括          。胰腺上皮细胞所处的内环境是          

3激素B          名称是通过         途径到达胰腺的。

4促进胰腺细胞分泌胰液的信号物质除激素A、B外还有             ,这几种信号物质具有的共同特点是________________答出一个特点即可

 

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