Question

【生物——选修1：生物技术实践专题】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配置了下列培养基，在适宜条件下培养）：

步骤	取样	培养基	培养结果
I	土壤样品	葡萄糖，（NH4）2SO4，K2HPO4·3H2O，KH2PO4,NaCl，CaCl2, MgSO4·7H2O，加水定容	培养液a
II	1mL培养液a	同上	菌落
III	挑取单菌落	细菌培养基	培养液b

（1）为实现筛选目的，步骤I所使用的培养基配方中，应去除_____________并加入高浓度的_____________。

（2）为实现目的菌的分离和计数，步骤II所使用的培养基中还应加入_____________制成平板，采用的接种方法是_____________，实验结果如图A。

（3）步骤III应挑取图A中_____________处的菌落，本步骤的目的是____________________。

（4）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60—70℃保温一定时间的，其作用是_________________。

Answer

葡萄糖蛋白质琼脂稀释涂布平板法a快速增加目的菌的种群数量（扩大培养）大幅度降低发酵液中其他酶的活性

【解析】本题考查微生物的选择培养及酶活性的检测，意在考查考生理解相关知识的要点，把握知识间的联系，形成知识网络结构的能力；具备探究简单生物学问题的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。

（1）培养基中添加特定的成分以促进需要的微生物生长而抑制其它微生物生长，用于进行微生物筛选；根据题意，为筛选产蛋白酶的高产菌株，步骤I所使用的培养基配方中，应去除葡萄糖并加入高浓度的蛋白质。

（2）为实现目的菌的分离和计数，步骤II所使用的培养基中还应加入琼脂（凝固剂）制成平板，采用的接种方法是稀释涂布平板法。

（3）图A中a处的菌落透明圈最大，故其菌种分解蛋白质的能力最强，所以步骤III应挑取图A中a处的菌落，本步骤的目的是快速增加目的菌的种群数量（即扩大培养）。

（4）图B曲线表明，60—70℃条件下，蛋白酶的活性很高而此时其它酶的活性很低，因此在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60—70℃保温一定时间的，可大幅度降低发酵液中其他酶的活性。