Question

某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。

（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________________作用；培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是___________灭菌。

A.高压蒸汽 B.干热 C.添加抗生素 D.过滤 E.紫外线照射 F.70﹪酒精浸泡

（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数往往_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。

Answer

脲酶（分解尿素的酶） 氨（NH3）凝固剂酚红D检测培养基平板灭菌是否合格4.7108低

【解析】注：答案错误，4.7×108

试题分析：常用 灭菌方法包括：高压蒸汽灭菌适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌；干热灭菌适用于需要保持干燥的空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌；无菌室缓冲间和接种箱常用紫外线灯作空气灭菌；微生物接种时的金属接种工具和试管口可以用灼烧灭菌；煮沸灭菌通常不能彻底杀灭一些微生物的孢子和芽孢，一般适用于餐具或不耐高温的食品等的消毒。

（1）分解尿素的酶是脲酶，所以分解尿素的微生物含有脲酶。尿素含有C、H、O、N元素，其水解产物是二氧化碳、水和氨气，氨气使得培养基的碱性增强。

（2）琼脂是凝固剂，使得培养基呈固态；培养基中的碱性物质可以与酚酞反应产生红色环带。

（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是高压蒸汽灭菌法。

（4）空白平板的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；根据题干提供的数据进行计算，每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数=（49+47+45）÷3×1000×10×1000=4.7×108。由于菌种可能重叠，所以统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。