Question

萌发的大麦种子中存在着两种淀粉酶：α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶耐热不耐酸；β-淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活。为测定萌发种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的差异，将发芽3天的大麦种子加蒸馏水研磨匀浆、离心取上清液得到淀粉酶提取液，进行如下实验。

操作步骤	1号试管	2号试管	3号试管
①	加淀粉酶提取液	1 ml	1 ml	1 ml
②	预处理	70℃恒温水浴15min， 取出冰浴中冷却	高温使α-淀粉酶 和β-淀粉酶失活	不处理
③	加缓冲液	2 ml	2 ml	2 ml
④	预保温	40℃恒温水浴 10min
⑤	加40℃预热的 淀粉溶液	2 ml	2ml	2 ml
⑥	保温	40℃恒温水浴5min
⑦	测定	加入试剂X， 50~65℃水浴5min，测定砖红色沉淀物的量

回答下列问题：

（1）步骤⑦中加入的试剂X为____________。

（2）上述实验操作步骤中，步骤②中对1号试管进行操作的目的是_____________________；为达成实验目的，设置的1、2、3号试管中，为对照组的一组是__号试管。

（3）通过上述实验，能大致比较萌发3天时种子的α-淀粉酶和β-淀粉酶活性的大小。比较的方法是______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。

Answer

斐林试剂使β-淀粉酶变性失活2测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α-淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β-淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大

【解析】试题分析：本实验的目的是测定萌发种子中α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶活性的差异；发的大麦种子中存在着两种淀粉酶：α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶．α﹣淀粉酶耐热不耐酸；β﹣淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活．若测定大麦种子中α﹣淀粉酶催化效率，因此要根据β﹣淀粉酶不耐热，在70℃15min后失活的特性排除β﹣淀粉酶的干扰．淀粉酶能将淀粉水解成还原糖，而还原糖可以用斐林试剂进行鉴定。

（1）本实验的目的是测定萌发种子中α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶活性的差异，淀粉酶分解淀粉为还原糖，还原糖可以用斐林试剂进行鉴定，步骤⑦中加入的试剂X为斐林试剂。

（2）β﹣淀粉酶耐酸不耐热，70℃处理15min即变性失活．上述实验操作步骤中，步骤②中对1号试管进行操作的目的是使β﹣淀粉酶变性失活，测定大麦种子中α﹣淀粉酶催化效率，为达成实验目的，设置的1、2、3号试管中，为对照组的一组是2号试管（2号试管α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶均失活，不能将淀粉变为还原糖，2号和1号对比能测定α﹣淀粉酶催化效率）。

（3）通过上述实验，可以测定各试管沉淀物的量，1、2号试管的差值代表α﹣淀粉酶的活性，3、1号试管的差值代表β﹣淀粉酶的活性，差值大的表示该酶的活性大，从而能大致比较萌发3天时种子的α﹣淀粉酶和β﹣淀粉酶活性的大小。