Question

【生物——选修1：生物技术实践】

大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌，其代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色。下面是其培养基配方：

成分	蛋白胨	乳糖	磷酸二氢钾	琼脂	蒸馏水	2%伊红水溶液	0.5%美蓝水溶液
含量	10g	10g	2g	20~30g	1000ml	20ml	13ml

回答下列问题：

（1）该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有________________和维生素。从物理性质来看，该培养基属于____________培养基。

（2）对该培养基进行灭菌时，可采用_____________法。在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是_______________。

（3）为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为_____________的菌落进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是_________________________________。

Answer

碳源、氮源固体高压蒸汽灭菌检测培养基制备是否合格（灭菌是否彻底）黑色当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌

【解析】试题分析： 微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。鉴别、培养大肠杆菌可使用伊红﹣美蓝培养基，菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽。

（1）该培养基中，蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养有碳源、氮源和维生素．从物理性质来看，该培养基加入琼脂作为凝固剂，因此属于固体培养基。

（2）对该培养基进行灭菌时，可采用高压蒸汽灭菌法．在接种大肠杆菌前，需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间，观察是否有菌落生成，其目的是检测培养基制备是否合格（灭菌是否彻底）。

（3）大肠杆菌的代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色．为检测严重污染水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在上述平板培养基中，应选择颜色为 黑色的菌落进行计数．通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。