Question

【加试题】回答下列（一）、（二)小题：

(一)请回答用梨酿制醋酸实验的有关问题：

(1)梨汁制作:用浑浊的梨汁制作澄清的梨汁可加入_________酶。为证明该酶的效果，可分别取等量______的梨汁，各加入等量的95%乙醇，预计前者出现的沉淀物较少。梨汁的澄清度与酶的______呈正相关。

(2)酒精发酵:干酵母制成糊状后，为使酵母迅速发生作用，可加极少量的______________。适宜条件下进行酒精发酵，待酵母下沉，可用_____________法将上清液（即果酒)取出。

(3)醋酸发酵:为防止培养基沾到三角瓶壁或试管壁上，在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用______。下列不能缩短果醋制作周期的措施是____________。

A.用果酒为原料                     B.增加醋杆菌的数量

C.将酒-水混合物pH调至7.0         D.发酵阶段封闭充气口

(二)某小组欲进行胚胎干细胞(ES细胞）的一系列研究。请回答：

(1)ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官，这体现了ES细胞的______________。为获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应，可对ES细胞进行____________。

(2)—个ES细胞变成ES细胞群的过程中，细胞__________(填“可能”、“不可能”)出现接触抑制现象。下列关于动物细胞培养和核移植的叙述，正确的是___________。

A.从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株

B.动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度

C.胚胎干细胞培养时，加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化

D.核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录

(3)为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠，可将褐毛基因通过__________法导入ES细胞核中，再将该核移植到去核的卵细胞中，经过_____________、胚胎培养、胚胎移植，最终由代孕母鼠产下克隆小鼠。

(4)为获得大量的上述克隆小鼠，可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行___________培养，理论上可获得无限个转基因小鼠。

Answer

果胶澄清的梨汁和浑浊（顺序不能置换）活性和数量蔗糖虹吸三角漏斗D发育全能性基因敲除可能D显微注射胚激活传代

【解析】试题分析：酵母菌是兼性厌氧微生物，酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，因此发酵条件之一是无氧环境，醋酸菌是好氧菌，只有在有氧气存在的条件下才能生长繁殖，因此发酵条件之一是通入氧气；果酒制作过程中菌种、温度等条件会影响果酒的品质。胚胎干细胞： 指由胚胎内细胞团或原始生殖细胞经体外特殊培养而筛选出的细胞。 胚胎干细胞(ES细胞)具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官。ES细胞的研究可追溯到上世纪五十年代，由于畸胎瘤干细胞（EC细胞）的发现开始了ES细胞的生物学研究历程。

(一)（1）梨汁浑浊的原因是含有大量的果胶，所以制作澄清的梨汁可加入果胶酶。设计对照实验证明该酶的效果，分别取等量澄清的梨汁和浑浊的梨汁，各加入等量的95%乙醇，预计前者（对照组）出现的沉淀物较少，梨汁的澄清度与酶的活性和数量呈正相关。

（2）干酵母制成糊状活化后，可加极少量的葡萄糖，使酵母迅速发生作用。适宜条件下进行酒精发酵，待酵母下沉，可用虹吸法将上清液（即果酒)取出。

（3）将培养基转移到三角瓶或试管中时用三角漏斗，可以 防止培养基沾到三角瓶壁或试管壁上。用果酒为原料，可以缩短果醋制作周期，A正确；增加醋杆菌的数量，可以加速果醋的生产，B正确；将酒-水混合物pH调至7.0，有利于果醋发酵，C正确；醋酸菌是好氧菌，发酵阶段封闭充气口，会导致醋酸菌死亡，发酵失败，D错误。

(二) （1）ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官，说明ES细胞的具有发育全能性。为获得适合人体移植的猪器官，减弱或消除排斥反应，可对ES细胞进行基因敲除。

（2）—个ES细胞变成ES细胞群的过程中，会出现接触抑制现象，可以加入胰蛋白酶将细胞分开，扩大培养。原代培养可以获得细胞株，A错误；胰岛素能促进血糖进入组织细胞，因此在培养基添加胰岛素是为了促进细胞对葡萄糖的摄取，B错误；胚胎干细胞培养时，加滋养层是不会促进细胞分化，通常使用的饲养层细胞为成纤维细胞，能够分泌一些促进干细胞维持的因子，C错误；核移植形成的重组细胞在初次分裂时，染色体高度螺旋花，所以核基因不转录，D正确。

（3）将基因导入动物细胞常用显微注射法。核移植后的重组细胞，需要经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植，最终由代孕母鼠产下克隆小鼠。

（4）含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行传代培养，理论上可获得无限个转基因小鼠。

【点睛】本题考查果酒和果醋的制作、动物细胞培养的相关知识，对于果酒和果醋制作过程及酵母菌和醋酸菌的新陈代谢类型和发酵条件的理解应用，动物细胞培养的过程的理解和应用，把握知识点间的内在联系是解题的关键。