Question

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。请回答下列问题。

(1)用显微镜观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色，微生物A产生的油脂不易挥发，可选用____________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以______________为碳源的固体培养基进行培养，从功能上划分该培养基属于________培养基。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量，一般选用___________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内’在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。

Answer

（1）苏丹III（或者苏丹IV） 萃取法

油脂

血细胞计数板 稀释涂布平板

45 40

【解析】（1）油脂可被苏丹Ⅲ染液或者苏丹IV染液染成橘黄色或红色；由于油脂不易挥发，所以常常采用萃取法。

（2）脂肪酶的微生物B可以分解脂肪，故可以以脂肪为碳源的固体培养基进行培养，不产生脂肪酶的微生物无法生存；从功能上看，该培养基属于选择性培养基。

（3）微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，活菌用稀释涂布平板法。

（4）45℃降解10g油脂所需酶量最大，故酶活性最小；40℃温度下降解10g油脂所需酶量最小，故酶活性最大，围绕40℃温度进行后续实验设计。

【考点定位】微生物的培养和应用

【名师点睛】植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。