Question

回答下列（一）（二）小题

（一）请回答野生酵母的培养和分离及果酒制作实验的有关问题：

（1）从葡萄多年生长的环境中获取少量土样，配制成土壤稀释液，然后取0．1ml稀释液加入到____培养基中，用____（工具）进行___分离，最后培养得到野生酵母菌。将分离获得的菌种进行诱变培养后，根据不同菌株的____特征，分别筛选出高产谷胱甘肽酵母菌（甲）和低产硫化氢的酵母菌（乙）。实验结束后，使用过的培养基应进行灭菌处理才能倒掉，目的是___________

（2）成熟的紫葡萄，常用____

A．高锰酸钾 B．次氯酸钠 C．乙醇 D．无菌水

溶液浸泡约5min，然后制成匀浆放入发酵罐中，并接种相应菌株，发酵获得高品质的葡萄酒。若向发酵罐中加入一定量的____，可获得酒精含量和糖含量较高的果酒。

（二）某小组欲进行基因工程菌的构建与研究。请回答下列问题：

（1）获取上述高产谷胱甘肽酵母菌（甲）的DNA，经____酶处理得到DNA片段后建立____，从中获取目的基因。

（2）将目的基因与质粒构建成____，将其导入低产硫化氢的酵母菌（乙）后，经培养获取大量酵母菌，再通过分离纯化培养，根据____

A．标记基因的表达  B．目的基因的导入 

C．硫化氢的含量  D．谷胱甘肽的含量

检测筛选出优良酵母菌。以上过程中的分离纯化培养相当于动物细胞____培养法。

（3）若要培养转基因植物，还需要用到_________技术，培养过程中主要是通过____________进行调控。

Answer

固体 玻璃刮刀 涂布 菌落 防止造成环境污染 A 蔗糖 限制性核酸内切酶 基因文库 重组质粒 D 克隆 植物组织培养（植物克隆） 平衡的植物激素配比（或植物激素或植物生长调节剂或生长素和细胞分裂素）

【解析】（一）

分析：参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：
（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 6CO2+12H2O+能量；            
（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6 2CO2+2C2H5OH+能量。

（1）从葡萄多年生长的环境中获取少量土样，配制成土壤稀释液，然后取0．1ml稀释液加入到固体培养基中，用玻璃刮刀（工具）进行涂布分离，最后培养得到野生酵母菌。将分离获得的菌种进行诱变培养后，根据不同菌株的菌落特征，分别筛选出不同的细菌。实验结束后，为防止造成环境污染，使用过的培养基应进行灭菌处理才能倒掉。

（2）成熟的紫葡萄，常用高锰酸钾溶液浸泡约5min，以达到消毒和去除农药残留的目的，然后制成匀浆放入发酵罐中，并接种相应菌株，发酵获得高品质的葡萄酒。若向发酵罐中加入一定量的蔗糖，可获得酒精含量和糖含量较高的果酒。

（二）

分析：基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基因的检测与鉴定。

（1）目的基因经限制酶处理得到DNA片段后建立基因文库，从中获取目的基因。

（2）将目的基因与质粒构建成重组质粒。转入高产谷胱甘肽基因的酵母菌的谷胱甘肽含量高，所以可以根据谷胱甘肽的含量检测筛选出优良酵母菌。以上过程中的分离纯化培养相当于动物细胞克隆培养法。

（3）若要培养转基因植物，还需要用到植物组织培养技术，培养过程中主要是通过生长素和细胞分裂素进行调控。