下列物质或过程不影响磷酸二酯键数目变化的是
A. RNA聚合酶、逆转录酶、Taq酶 B. DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶
C. 遗传信息的翻译、PCR中DNA解链 D. cDNA文库的构建、染色体的结构变异
下列关于基因工程技术的叙述，正确的是
A. 切割质粒的限制酶能特异性识别的序列均由6个核苷酸组成
B. PCR反应中两种引物的碱基间互补配对以保证与模板链的正常结合
C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因
D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制
某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达这产生生长激素。己知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而
大肠杆菌不带有任何抗性基因，下列叙述错误的是
A. 大肠杆菌可能未导入质粒
B. 导入大肠杆菌的可能是重组质粒，也可能是质粒
C. 可用含靑霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D. 在含青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
有关基因工程的叙述正确的是
A. 限制酶只在获得目的基因时才用
B. 重组质粒的形成是在细胞内完成的
C. 质粒都可以作为运载体
D. DNA连接酶使黏性末端之间形成磷酸二酯键
图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因通过___________（方法）注入羊的_______________中，发育完全的母羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。
（2）图2中的目的基因D需要同时使用MestI和PstI才能获得，而图1所示的质粒无限制酶MestI的酶切位点。所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：首先用______酶处理质粒；然后用______处理质粒，使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸；再用______ 处理质粒形成限制酶切位点，它可被______识别。（供选答案如下：①EcoRI ②MestI ③PstI ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶）
（3）假设图1质粒上还有一个PstI的识别序列，现用EcoRI、PstI单独或联合切割同一质粒，得到的DNA长度片段如下表。请在下图中画出质粒上EcoRI和PstI的切割位点。（标出酶切位点之间的长度）
______
为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，某同学进行了如下实验。请分析回答下列问题：
（1）配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加人适量的_______和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是_____________。
（2）接种微生物的方法有很多，图1中过程①②③所示的方法为____________。用该方法统计样本菌落数后，所得数据需要乘以10n后，才可表示乳酸菌的数量（单位：个/ml)，这里的n=____________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是____________。
（3）为了检测乳酸菌对抗生素的敏感性，取该单菌落适当稀释，接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A____________（填“敏感”或“不敏感”）；含C滤纸片周围的透明圈比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是____________。
