Question

水质细菌学检验是培水和污水水质分析工作中的一项重要指标。作为水质日常检测的七项指标（色度、浊度、细菌总数、大肠菌群、余氯、铁、锰）之一的细菌总数和大肠杆菌指数，能非常直观地反映水费细菌污染的程度。例如，我国饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过3个。某学校生物兴趣小组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红—美蓝培养基培养时，菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题：

（1）配制培养基：配置伊红—美蓝培养基时，除水、无机盐、蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等基本原料外，还需要加入__________作为凝固剂。从功能上讲，这种培养基属于__________________。

（2）倒平板：配置好的培养基用_________法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板。平板冷凝后应将平板__________放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基。在接种之前，要随机选取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________。

（3）接种：该小组采用平板划线法分离自来水中的细菌，操作时，接种环通过_________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_________。培养一段时间后，能正确表示该小组得到的结果为上图中的_________。

Answer

琼脂 鉴别培养基 高压蒸汽灭菌 倒置 检测培养基平板灭菌是否合格 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 A

【解析】试题分析：培养基根据物理性质可分为固体培养基和液体培养基，培养基的基本营养成分有碳源、氮源、无机盐、水等成分；灭菌和消毒的主要区别是：消毒是指使用较为温和的物理或化学方法反杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）；灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

（1）根据题干信息，该培养基为固体培养基，所以要加入凝固剂琼脂。该培养基中含有伊红美蓝，其目的是用来鉴别大肠杆菌的，所以该培养基属于鉴别培养基。

（2）配制好的培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌后，待培养基冷却到50℃左右倒平板．等待平板冷却凝固（大约需5～10min）后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止水蒸气凝结的小水滴污染培养基。在接种之前，要随机选取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格。

（3）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

（4）图中A表示的是平板划线法，而B表示的是稀释涂布平板法。

【点睛】本题是对微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤的综合性考查，回忆微生物实验室培养过程中对实验用品进行灭菌常用的方法及检测培养基灭菌是否彻底的方法、估算样品中菌株数的方法、微生物常用的接种方法和具体操作步骤，然后解答问题。