Question

【加试题】回答下列（一）、（二）小题。

(一）泡菜是人们喜爱的食品，但在腌制的过程中会产生一定量的亚硝酸盐，危害人们的健康。研究人员检测了不同浓度的食盐、不同发酵阶段的泡菜中的亚硝酸盐含量，结果如下图所示。

请回答：

（1）制作泡菜时如希望发酵快一些，可将蔬菜放在___________中浸泡1分钟后入坛。发酵坛中还可加一些白酒，加白酒的目的是增加醇香感和___________。

（2）据图分析，下列叙述错误的是（_____）

A.腌制泡菜的最佳食盐用量约为5%     B.过多的食盐可能会抑制发酵作用

C.腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升       D.食用泡菜最安全的是腌制后3〜9天

（3）在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成_______________色产物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以_________为纵坐标。对样品和标准溶液的测定中，要用光程相同的__________________。

(二）我国目前临床使用的乙肝疫苗大多为基因工程疫苗，其有效成分是一种叫做乙肝表面抗原的蛋白质（S蛋白），对应的基因为s基因。请回答：

（1）在构建重组DNA分子时，要用限制性核酸内切酶处理_________，并用_________酶使两者结合。将重组DNA分子导入到哺乳动物细胞，经筛选得到工程细胞。

（2）在细胞培养过程中，工程细胞在生长过程中有_________现象，需要定期使用_________酶处理，以便于分瓶培养。

（3）为提髙工程细胞培养的成功率，下列措施中不幸采用的是（_____）

A.取单个细胞进行培养       B.加入胰岛素

C.二氧化碳培养箱           D.加入动物血清

（4）由于哺乳动物细胞培养较难，成本较高，近些年科学家们又发明了“乳腺生物发生器”，进而从转基因动物的乳汁中提取所需产品。在这种技术中，作为重组DNA分子受体细胞的一般是__________________。

Answer

开水 抑制杂菌生长 D 紫红色 光密度值 比色杯 s基因和载体DNA DNA连接 接触抑制 胰蛋白 A 受精卵

【解析】试题分析：制作泡菜所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型．泡菜中亚硝酸盐的检测可以用比色法，即在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行比较，可以估测出泡菜中亚硝酸盐的含量。

DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体；由于基因的选择性表达，在利用转基因动物生产药物时，要将药用蛋白基因和乳腺组织特异性表达的启动子等调控组件重组在一起。

(一）（1）制作泡菜时，将蔬菜放在开水中浸泡1分钟后入坛，可以发酵快一些。发酵坛中加一些白酒，可以增加醇香感和抑制杂菌生长。

（2）根据图中曲线分析，5%的食盐，9天以后亚硝酸盐的含量最低，是制作泡菜的最佳浓度，A正确；过多的食盐可能会抑制发酵作用，B正确；腌制初期泡菜的亚硝酸盐含量上升，C正确；食用泡菜最安全的是腌制9天以后，D错误。

（3）在利用光电比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时，在样品溶液中加入显色剂会生成紫红色产物。绘制标准曲线时，可以亚硝酸钠的质量为横坐标，以光密度值为纵坐标。对样品和标准溶液的测定中，要用光程相同的比色杯。

(二）（1）根据题意，s基因为目的基因，构建基因表达载体时，需要用限制性核酸内切酶处理s基因，并用DNA连接酶将两者连接起来

（2）细胞在生长过程中有贴壁生长和接触抑制现象，需要定期使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理使细胞分散，以便于分瓶继续培养。

（3）为提髙工程细胞培养的成功率，可以采用多个细胞分散培养，A错误；动物细胞培养液需要加入胰岛素，B正确；需要放进二氧化碳培养箱培养，C正确；需要加入动物血清，D正确。

（4）一般动物细胞工程利用受精卵作为受体细胞，可以通过显微注射法将表达载体导入受精卵。

【点睛】本题考查了制作泡菜、用比色法测定亚硝酸盐含量的变化、基因工程以及细胞工程等方面的知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析、处理，能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订的能力。