Question

已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示。请回答下列问题：

（1）过程①代表的是____________，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的__________所识别，以便于其催化转录过程。

（2）上图为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2 000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是________个。

（3）在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的______________数目。

（4）在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次是将____________________筛选出来，第二次是将____________________________筛选出来。

（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的__________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的__________________与分离出的病毒进行特异性检测。

Answer

逆转录 RNA聚合酶 400 浆细胞 杂交瘤细胞 能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 A蛋白 抗A蛋白的单克隆抗体

【解析】试题分析：梳理基因工程的基本操作步骤、动物细胞融合技术、单克隆抗体、基因的结构及其转录等知识并形成知识网络。在此基础上，结合题意进行相关试题的解答。

(1)过程①表示以RNA为模板合成DNA的逆转录过程。 启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA；终止子位于基因的尾端，具有终止转录的作用。因此过程③构建A基因重组载体时，重新构建的启动子和终止子都应该能被受体细胞的RNA聚合酶识别。

(2) 依题意可知：A基因中能指导蛋白质合成的片段即空白区域共含有2000－800＝1200个碱基，其中C＋G＝400个，A＋T＝1200－400＝800个。依碱基互补配对原则，每条链上所对应的该片段中A＋T＝400个。因mRNA是由该区域的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，通过转录产生，所以由该区域转录产生的mRNA中A和U总数是400个。

(3) A蛋白为主要抗原。给小鼠皮下反复注射A蛋白的目的是增强小鼠的免疫能力，使机体产生较多的浆细胞。

(4) 在制备单克隆抗体的过程中，需要两次筛选。第一次是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；第二次是利用专一抗体阳性检测筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。

(5)在预防接种时，可以利用A蛋白作为抗原制备疫苗；或者从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。

【点睛】本题结合“疫苗的生产和抗体的制备流程图” 综合考查学生对基因工程和细胞工程的相关知识的识记和理解能力，准确判断图中各过程的名称是解答此题的关键。①为逆转录，②为获取目的基因，③是基因表达载体的构建，④是将目的基因导入受体细胞，⑤是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞，⑥为B细胞的增殖分化，⑦是细胞融合，X 为杂交瘤细胞。