Question

【生物——选修3：现代生物科技专题】

利用生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得凝血因子IV，用于血友病的治疗。请回答下列问题：

（1）根据凝血因子IV基因的碱基序列，可用_____技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时，所用到的工具酶是_______，该基因表达载体中，除凝血因子IV和标记基因外，还应该包括_________。

（2）将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是______。受体细胞选用受精卵的优点是细胞大易操作、营养物质含量高和________。

（3）在体外胚胎培养时，应选用囊胚的______进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。

（4）人凝血因子IV是一种胞外酶，该蛋白的加工是在______等细胞器上进行的。人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是_________。

Answer

PCR 限制性核酸内切酶和DNA连接酶 启动子和终止子 纤维注射法 细胞全能性高 滋养层细胞 内质网、高尔基体 基因的选择性表达

【解析】试题分析：启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质；终止子也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端；分泌蛋白的合成、加工和运输过程：最初是在内质网上的核糖体中由氨基酸形成肽链，肽链进入内质网进行加工，形成有一定空间结构的蛋白质由囊泡包裹着到达高尔基体，高尔基体对其进行进一步加工，然后形成囊泡分泌到细胞外。

（1）可以根据基因编码序列两端的部分碱基序列设计引物，用PCR技术进行体外大量扩增获得目的基因。构建该基因表达载体时，需要限制酶内切酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶链接，形成表达载体；启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质．终止子也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

（2）受体细胞是动物细胞，常用显微注射法将目的基因导入受体细胞中，由于受精卵细胞大易操作、营养物质含量高、细胞全能性高，因此常被作为受体细胞选用。

（3）在做胚胎性别鉴定时，需要取囊胚的滋养层细胞做DNA分析，进行性别鉴定。

（4）分泌蛋白在内质网上的核糖体上合成，进入内质网进行加工、分类、包装，形成囊泡进入高尔基体，由高尔基体进行进一步加工，形成囊泡，运向细胞膜，由细胞膜分泌到细胞外，由于基因的选择性表达，所以人凝血因子IV只在乳腺细胞合成。

【点睛】本题主要考查了PCR技术、目的基因导入受体细胞的方法、胚胎培养、分泌蛋白的合成分泌等相关知识,意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。