Question

从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤：采集菌样→富集培养 → 纯种分离→性能测定。

（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从________________________的环境采集。

（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_______的培养基并在____________条件下培养。

（3）下面两组图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是______________，获得图B效果的接种方法是________。

（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行______，接种前要进行________灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在________条件下进行。

Answer

含盐量高（如海滩等） 以淀粉为唯一碳源 高温 稀释涂布平板法 平板划线法 pH调节 高压蒸汽 无菌

【解析】（1）噬盐菌的菌样应从高盐环境采集，如含盐量高的海滩等｡

（2）微生物产生耐高温的淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基,并在高温条件下培养｡

（3）图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法｡

（4）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行｡

【点睛】比较两种分离纯化方法的注意事项：

平板划线法：

(1)接种环的灼烧

①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物；

②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端；

③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者。

(2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死菌种。

(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。

(4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。

稀释涂布平板法：

(1)稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。

(2)涂布平板时

①涂布器用体积分数为70%酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃；

②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精；

③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体。