Question

下图为利用人成纤维细胞(具分裂能力、能在HAT培养基上存活)和小鼠骨髓瘤细胞(具分裂能力、不能在HAT培养基上存活)进行人类基因定位的操作示意图，请回答相关问题：

(1)图示方法是____________技术的应用，该技术的基础是__________技术。

(2)操作所用的成纤维细胞应传代_____代以内，诱导融合时需要加入的化学促融剂是______。

(3)人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成______细胞，再经过一次________，形成单核细胞。

(4)HAT培养基起_______培养作用，培养时温度应为_____°C，操作中加入乌本苷的目的是_________。

(5)下表所示为杂交细胞A、B、C中存在的人类染色体及人类特有的4种酶（“十”表示存在，“一”表示不存在），这4种酶均为单基因编码产生，据表判断，编码_______酶的基因位于染色体2上。

Answer

)动物细胞融合 动物细胞培养 10 PEG 多核 有丝分裂 选择 36.5±0.5 除去成纤维细胞 m和p

【解析】试题分析：分析题图，图示为利用人成纤维细胞（具分裂能力、能在HAT培养基上存活）和小鼠骨髓瘤细胞（具分裂能力、不能在HAT培养基上存活）进行人类基因定位的操作示意图，成纤维细胞和小鼠骨髓瘤细胞在促融剂的作用下形成三种杂交细胞，即成纤维细胞自身融合细胞、小鼠骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交细胞；在HAT培养基上筛选出成纤维细胞自身融合细胞和杂交细胞；加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞，留下杂交细胞。

（1）由图分析，该过程为动物细胞融合，其基础是动物细胞培养。

（2）目前使用的正常细胞通常为10代以内的，因为10代以内的细胞可以保持细胞正常的二倍体核型。诱导两个动物细胞融合的方法：物理（离心、振动、电刺激）、化学（PEG）、生物诱导（灭活的病毒）。

（3）人、鼠细胞先经过细胞膜融合形成多核细胞，经过一次有丝分裂，形成单核细胞。

（4）据题干信息，人成纤维细胞能在HAT培养基上存活，而小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上存活，则HAT培养基起选择培养作用，筛选出人成纤维细胞和成纤维细胞融合的杂交细胞；动物细胞培养的适宜温度为36.5±0.5℃；由图可知，操作中加人鸟本苷的目的是除去成纤维细胞，筛选出杂交细胞。

（5）据表判断，杂交细胞A中存在2和3号染色体，表达出酶m和p；杂交细胞B存在1和2号染色体，表达出酶n和q；说明编码m和p酶的基因位于染色体2上。

【点睛】本题考查动物细胞融合、动物细胞培养、基因在染色体上等相关知识，意在考查学生运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。