Question

富集培养是微生物学中强有力的技术手段之一，主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离得到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

（1）本实验所需培养基为_______________，碳源为________________________。

（2）实验原理是_____________________________________________________。

（3）①→③重复培养的目的是__________________________________________。

（4）⑤菌落中大部分是降解_________________的微生物。

（5）⑥为__________组，⑦为_______组，设置⑥的目的是___________________。

（6）⑤→⑥采用___________法接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是_______。

Answer

选择培养基 对羟基苯甲酸 利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，分离出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物 增大对羟基苯甲酸微生物的比例 对羟基苯甲酸 对照 实验 说明通过富集培养的确得到了能降解对羟基苯甲酸的微生物 单细胞挑取 接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物

【解析】（1）如果要设计实验探究该实验分离出的细菌是否只能利用对羟基苯甲酸作碳源，那么实验所用培养基应是对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基。

（2）本实验原理是利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，分离出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物。

（3）经过①②③的重复培养，增大了分解对羟基苯甲酸的微生物的比例。

（4）由于本实验培养的微生物主要是能降解对羟基苯甲酸的微生物，所以⑤菌落中大部分是降解对羟基苯甲酸的微生物。

（5）⑥中没有对羟基苯甲酸，⑦中含有对羟基苯甲酸，所以⑥是对照组，⑦是实验组。对照的目的是说明通过富集培养的确得到了能降解对羟基苯甲酸的微生物。最后通过设立对照及单菌落挑取法将培养基上的单菌落分别接种到含有对羟基苯甲酸及不含有该物质的培养基上，验证是否得到了目的菌株。

（6）⑤→⑥采用单细胞挑取法接种到⑥⑦的培养基中，整个操作过程都应是无菌操作，接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环用完之后也要在火焰上灼烧以杀灭残留微生物。

【点睛】注意：本题涉及的富集培养基是一种选择培养基，可用于筛选具有特定代谢特点的微生物。由于本实验是为了选择出能降解对羟基苯甲酸的微生物，所以该实验的培养基中加对羟基苯甲酸应为唯一碳源。