Question

电影中，“蜘蛛侠”能产生高强度的蜘蛛丝，现实中的基因工程也创造出“蜘蛛羊”，该羊的乳汁中含有蛛丝蛋白，高强度的蛛丝蛋白可用于许多重要的特种工业领域，请回答：

(1)为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从_________ (基因组/cDNA)文库中获取，并与______________等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；再通过_________等方法，将表达载体导入羊的______________，获得重组细胞。

(2)我们对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加__________。

(3)细胞培养过程中，将细胞置于5%CO₂气体环境中，CO₂的作用是_______。

(4)如果利用DNA分子杂交原理检测目的基因是否导入受体细胞，应该用___________________作为探针。

Answer

【答题空45-1】cDNA 【答题空45-2】羊的乳腺蛋白基因的启动子 【答题空45-3】显微注射 【答题空45-4】受精卵 【答题空45-5】动物血清 【答题空45-6】维持培养液的pH 【答题空45-7】放射性同位素(或荧光蛋白)标记的蛛丝蛋白基因

【解析】分析：获取目的基因，最好是先建立基因文库。有了基因文库，就可以随时从中提取所需要的目的基因。其中基因组文库含有一种生物的全部基因；cDNA文库含有一种生物的部分基因。从cDNA文库中获取目的基因更高效；目的基因与启动子、终止子调控组件重组在一起，可保证目的基因的成功表达。

（1）为保证实验成功，产生蛛丝蛋白的基因需要从cDNA文库中获取目的基因更高效，并与羊的乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，然后与载体相连构建成为表达载体；动物基因工程中选择的方法是显微注射，采用的受体细胞是受精卵。

（2）由于对细胞所需的营养条件还没有完全研究清楚，所以在早期胚胎的培养中，往往还需要添加动物血清或者血浆。

（3）细胞培养过程中，将细胞置于5%CO2气体环境中，CO2的作用是维持培养液的pH。

（4）如果利用DNA分子杂交原理检测目的基因是否导入受体细胞，应该用放射性同位素(或荧光蛋白)标记的蛛丝蛋白基因作为探针。

【点睛】特别注意：要想从转基因动物分泌的乳汁中提取到目的基因控制合成的蛋白质，必须在目的基因的前端连接上乳腺蛋白基因的启动子等调控组件。