Question

某研究小组对生活用水中大肠杆菌含量进行检测，并研究在高盐度（NaCl）工业废水中提取可降解有机物的耐盐菌，请分析回答有关问题：

（1）大肠杆菌进行检测的操作和配方图如下：

图甲中所示大肠杆菌进行检测的方法称为___________法。

（2）若要将图乙中大肠杆菌检测配方修改后用于培养可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，则应去除的成分有___________，同时需要添加的成分是___________。

（3）将高盐度工业废水采用平板划线法接种在含3%NaCl的固体培养基上（如图一）。然后置于适宜条件下培养一段时间，观察形成的菌落特征；再将分离纯化后的菌株制成菌液，取等量菌液，分别加入到不同NaCl浓度的液体培养基中摇床培养35小时，定时取样统计活菌数目，测定结果（如图二）。

图一所示操作，第一次划线灼烧接种环的目的是 __________，第二次及之后的几次划线前灼烧接种环的目的是___________________________________________。图二所示活菌数目在进行统计时，直接从静置的培养液中取样计数的做法是错误的，正确的操作是将培养液___________后取样计数，且每种浓度需设3个重复实验求其平均值。

（4）由图二可知，该耐盐菌最适合处理含___________（浓度）NaCl的工业废水，原因是_____________ 。

Answer

滤膜 伊红、美蓝（乳糖） （高浓度）氯化钠 杀死上次划线后接种环上残留的菌种（使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端） 振荡摇匀 3% 据图可知，在3种NaCl浓度下，3%时该菌的相对数量最多

【解析】试题分析：分析题图甲可知，实验将待测水样进行过滤，得到的滤膜进行微生物培养，因此水中的大肠杆菌应留在滤膜上，则滤膜上小孔的直径大小需要控制。培养基的基本成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源，另外鉴别培养基是固体培养基，必须加入凝固剂琼脂。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）根据图形分析可知，图甲中所示大肠杆菌进行活菌计数的方法为滤膜法。

（2）若用乙培养基培养可降解高盐度工业废水中有机物的耐盐菌，应去除伊红美蓝，同时还需要需要添加（高浓度）氯化钠。

（3）平板划线操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线操作结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。图二所示活菌数目在进行统计时，应该将培养液摇匀后取样计数，且每种浓度需设3个重复实验求其平均值。

（4）由图二可知，该耐盐菌在3%NaCl浓度时数量最多，故该耐盐菌最适合处理含3%NaCl的废水。

【点睛】解答本题的关键是分析平板划线法的图形，弄清楚每一次划线前后灼烧的目的。