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如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄...

如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因。图中EcoR Ⅰ、Pvu Ⅰ为两种限制酶,质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。回答下列问题。

 

(1) 图中三种质粒中不能作为目的基因运载体的是________,理由是________________

(2) 在基因工程的操作过程中,需要检查目的基因是否重组到质粒中,应使用________酶切重组质粒,完全酶切后,进行电泳检测。若电泳图谱中出现长度为1.1kb和5.6 kb,或者________kb和________kb的片段,则可判断该重组质粒已与目的基因重组成功。

(3) 为研究目的基因D的功能,研究人员用下图所示的引物组合分别扩增D基因的D1片段、D3片段(DNA复制子链的延伸方向5′→3′)。

注:引物Ⅱ、Ⅲ上的x,y片段分别与N基因两端互补配对

用引物Ⅰ、Ⅱ组合扩增后,得到的绝大部分DNA片段是下图中的________

ab cd

②将大量N基因片段与扩增得到的D1片段、D3片段置于PCR反应体系中进行扩增,得到的绝大多数扩增产物是________(填“D1-N”或“D1-D3一N”或“D3-N”或“D1-N—D3”)。

 

质粒A、质粒C (质粒A)缺少标记基因 (质粒C) 复制原点会被限制酶切割 EcoRⅠ 3.1 3.6 d D1-N-D3 【解析】试题分析:分析题图:如图所示为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段示意图,图中Ap为氨苄青霉素抗性基因,Tc为四环素抗性基因,lacZ为蓝色显色基因;EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离。 (1)图中质粒A缺少标记基因;质粒C在用和目的基因相同的限制酶切割时,复制原点会被限制酶切割,会影响重组质粒的自主复制.因此,能作为目的基因运载体最理想的质粒是B。(2)分析图解可知,在目的基因上存在EcoRⅠ酶的切割位点,因此在基因工程的操作过程中,需要检查目的基因是否重组到质粒中,应使用该酶切重组质粒.目的基因和质粒B形成的重组质粒长度为2.7-0.1+(4.0-1.0)=5.6kb(质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的大片段)、0.1+1.0=1.1kb(质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的小片段)或2.7-0.1+1.0=3.6(质粒且切割后形成的大的片段+切割目的基因时形成的小片段)、0.1+3.0=3.6(质粒且切割后形成的小的片段+切割目的基因时形成的大片段)。 (3)①根据题图分析,用引物Ⅰ、Ⅱ组合扩增扩增的是D1片段,以引物Ⅱ所在的单链为模板在引物Ⅰ的作用下合成DNA时,引物Ⅱ上的X片段也被作为模板合成子链,因此得到的绝大部分DNA片段是图3中的d。 ②由于引物Ⅱ、Ⅲ上的x、y片段都能与N基因两条链上的碱基进行互补配对,因此将大量N基因片段与扩增得到的D1片段、D3片段置于PCR反应体系中进行扩增,得到的绝大多数扩增产物是D1-N-D3,A2基因被敲除。 【点睛】解答本题的关键是分析质粒中和目的基因两侧的限制酶的种类,确定可以利用的限制酶的种类,注意切割后目的基因可以插入的同时,还不能破坏复制原点、标记基因等,且应该插入启动子与终止子之间。  
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酸奶是以牛奶为原料,经过巴氏杀菌后再向牛奶中添加有益菌,经发酵制成。家庭自制酸奶的安全隐患是有害菌污染问题,为检测自制酸奶是否被杂菌污染,进行如图所示操作。回答下列问题。

(1) 制备牛肉膏蛋白胨培养基,倒平板待其冷却后将平板倒置的主要原因是________

(2) 取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,涂布前要将涂布器________才能涂布。如果培养基上出现________的菌落,说明自制酸奶已被杂菌污染。

(3) 在恒温培养箱中培养一段时间后,3个平板上菌落数分别为65个、63个、64个,则可以推测酸奶中每毫升含菌数为________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是________

(4) 已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌,进一步分离纯化乳酸菌的方法是________,该操作中常使用的接种工具是________。若培养后获得的某个平板,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落,造成第一条线上无菌落的可能操作失误有________________

 

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某研究小组开展了对某人工湿地生态系统组成和功能的研究,他们选取了该湖泊中5类不同的生物,并对其消化道内食物组成进行分析,结果如下表。下图为某同学绘制的该人工湿地生态系统碳循环示意图,甲~丁代表生态系统的4种成分,①~⑦表示生理过程。回答下列问题。

   

(1) 写出表中生物可能形成的食物链网________

(2) 图中丁指的是________,图中以CO2形式传递的过程有________(填序号)。

(3) 人工湿地生态系统能消除污染、净化水源,体现了生物多样性的________价值。若某化工厂违规排放大量污水,引起部分浮游动物死亡,进一步加重了污染,进而导致更多生物死亡,该过程属于________调节,这违背了生态工程的________原理。

(4) 某同学查阅资料得到科研人员针对鳜鱼的能量摄入和利用相应研究的结果:

则鳜鱼同化的能量为________kj·m-2·a-1

 

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果蝇的灰身对黑身为显性,由位于常染色体(Ⅱ)上基因B控制,基因R或r位于X染色体的非同源区段,会影响雌、雄黑身果蝇的体色深度。现有黑身雌果蝇与灰身雄果蝇杂交,F1全为灰身,F1随机交配,F2表现型及数量如图1所示。回答下列问题。

(1) 在等位基因R、r中,能使黑身果蝇的体色加深的基因是________

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(3) 若亲代黑身雌果蝇细胞中X、Ⅱ号染色体发生如图2所示的变异,变异细胞在减数分裂时,所有染色体同源区段须联会且均相互分离,才能形成可育配子。在不考虑其它变异的情况下,该黑身雌果蝇产生的卵细胞类型有________种,该黑身雌果蝇与正常雄果蝇杂交,生育染色体组成正常后代的概率为________

 

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(1) 图1中丁细胞名称是________,其内含有________条染色单体。

(2) 图1中含有2个染色体组的细胞有________;该动物体内细胞染色体最多有________条。

(3) 图2中a、b、c分别表示________,图1中丙与图2中________细胞类型相对应。

(4) 该动物某一细胞分裂后产生了如图所示的子细胞,该子细胞形成的原因可能有________________

 

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某实验小组以洋葱为对照,研究三种常见的园林植物蔓花生、白蝴蝶合果、大叶红草的根尖细胞有丝分裂,测定了其生根数量及有丝分裂指数(分裂期的细胞数占细胞总数的百分数)。回答下列问题。

(1)该实验制作装片过程为:

图中的A液由________配制而成,用B液进行漂洗的目的是________

(2)某同学在显微镜下看到的细胞都呈长方形,细胞核较小,找不到分裂期的细胞,可能的原因有________

(3)这四种植物的生根数量实验结果如下表所示。若因时间仓促,做有丝分裂实验准备时间较短,则应该选择________作为实验材料较为理想。

(4)分析下图所示的四种植物有丝分裂指数的实验结果,可知取材最佳的时间是________,原因是____________________。除了洋葱外,最好选择________作为实验材料,原因是____________________

 

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