Question

【生物——选修3 ：现代生物科技专题】

下图为培育转基因奶牛获得人血清白蛋白（HSA）的流程。回答下列问题：

（1）PCR扩增HSA基因使用的酶是____________________，构建含有人HSA基因表达载体时所用的工具酶有______________________________。

（2）图中培育转基因动物属于________（填“有性”“无性”）繁殖，过程①常用的方法是____。在过程②进行之前，需对早期胚胎进行性别鉴定，可取胚胎细胞进行DNA分析，其采用的基因探针来自__________（填“常”“性”）染色体。

（3）检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，可采用_____________技术，但在转基因牛乳汁中却没有检测到HSA的存在，若从构建基因表达载体的角度分析，最可能的原因是_________。

Answer

热稳定DNA聚合酶（Taq酶、耐高温DNA聚合酶） 限制酶和DNA连接酶 有性 显微注射法 性 抗原—抗体杂交 位于目的基因前后的启动子和终止子设计不理想，导致目的基因不能进行表达

【解析】试题分析：PCR扩增技术与自然条件下的DNA复制相比，不同之处在于，需要引物，需要耐高温的热稳定性DNA聚合酶。基因工程的操作步骤中，在导入目的基因之前，需要构建基因表达载体，即将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起。图中①表示将目的基因导入受精卵，常用显微注射法；②表示早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

（1）PCR扩增时需要耐高温的热稳定性DNA聚合酶；构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶。

（2）图中受精卵是精子和卵细胞受精作用形成的，所以培育转基因奶牛的过程属于有性生殖。图中过程①表示将目的基因导入受精卵，常用显微注射法；对早期胚胎进行性别鉴定，应该选择性染色体上的基因作为探针。

（3）若要检测牛奶中是否含有人血清白蛋白，这属于翻译水平的检测，可采用抗原-抗体杂交技术。若在转基因牛乳汁中却没有检测到HSA的存在，最可能的原因是位于目的基因前后的启动子和终止子设计不理想，导致目的基因不能进行表达。