Question

【生物——选修1：生物技术实践】

苹果干腐病是一种名为茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病，病菌通常由枝条伤口入浸感染，在伤口处形成溃疡。某中学的科研小组计划分离出该真菌，并进行药物防治实验，为苹果干腐病的防治提供合理的建议。经过查阅资料，确定了分离时所用的PDA培养基配方，如下表所示：

物质	马铃薯	葡萄糖	自来水	氯霉素
含量	200g	20g	1000mL	0.3g

该真菌在上述PDA培养基上生长时有特定的形态特征：辐射状白色匍匐菌丝，绒毛状。

（1）要获得菌落，则上表中还应添加的成分是___________。氯霉素的作用是_______________。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、_______、倒平板。等平板冷却凝固后，将平板________，以防止冷凝水污染培养基。

（2）用剪刀从染病枝条溃疡处剪取1×1cm²的患病组织，并用0.1%的升汞进行消毒，置于培养基中心，在合适条件下进行培养，共培养五组。待菌落形态特征稳定后，用___________法将该致病菌分别转移至含有等量0.5%苦水碱剂、40%福美砷、清水的上述PDA培养基中进行抗药性实验,并每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。

①选取________的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目。

②记录结果如下：

小组	0.5% 苦水碱剂	40%福美砷	清水
菌落数目	2	8	17

从结果分析可知，__________________能很好的抑制该真菌的生长，适合防治苹果干腐病。

Answer

【答题空11-1】琼脂(或凝固剂） 【答题空11-2】抑制细菌等杂菌的生长 【答题空11-3】灭菌 【答题空11-4】倒置放置 【答题空11-5】平板划线 【答题空11-6】菌落数目稳定 【答题空11-7】0.5%苦水碱剂

【解析】试题分析：培养基的成分包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子；制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤为计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。

（1）要获得菌落，需要用固体培养基，所以上述表格中应该加入凝固剂，培养基中加入的氯霉素是抗生素，可以抑制细菌等杂菌的生长。培养基的制备步骤包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。等平板冷却凝固后，将平板倒置放置，以防止冷凝水污染培养基。

（2）菌落形态特征稳定后，用平板划线法将该致病菌进行转移。

①选取菌落数目稳定的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致遗漏的菌落数目。

②从结果分析可知，0.5%苦水碱剂能很好的抑制该真菌的生长，适合防治苹果干腐病。

【点睛】本题的知识点是培养基的配制和分类，微生物的培养和应用，主要考查学生根据实验目的设计和完善实验步骤并对实验结果进行分析获取结论的能力。