Question

醚苯磺隆是常见的除草剂，在环境中难以降解。某实验小组从某农药厂的污泥中富集、筛选出了一株醚苯磺隆降解菌株MB-1，并研究了其降解效率。请回答下列问题：

（1）该实验小组将取自生产醚苯磺隆农药厂废水处理池中的废水按5%的体积分数接入醚苯磺隆含量为200mg/L的MSM液体培养基中，每3d以5%的接种量接入新鲜的醚苯磺隆MSM液体培养基中，这一培养过程称为______________，其目的是____________________。

（2）该实验小组将培养液进行梯度稀释后，将稀释倍数为10³、10⁴和10⁵的培养液分别取0.1mL接种到醚苯磺隆MSM固体培养基上，每个稀释倍数涂布三个培养基，最终形成的菌落数分别为627、622、658、58、62、63、3、6、7个，则原菌液每升含有的细菌数为_________个，该计数方法得到的测量值一般比实际值偏小，其原因是__________。若要检测水体中全部细菌（无论是否为活菌）的数目，应采用的方法是_______。

（3）研究发现当培养基中含有葡萄糖和醚苯磺隆时，MB-1菌株只利用易于摄取的葡萄糖作为能源和碳源，同时诱导产生一种能分解醚苯磺隆的关键酶，该实验小组研究了不同的葡萄糖浓度对MB-1降解醚苯磺隆能力的影响，实验结果如图所示。

①同时含有葡萄糖和醚苯磺隆的培养基比只含醚苯磺隆的培养基更有利于MB-1菌株的生长繁殖，其原因可能是_____________________________；

②当葡萄糖浓度较低时，醚苯磺隆降解能力较弱的原因是______________，最有利于醚苯磺隆降解的葡萄糖浓度为________________。

Answer

选择培养 初步筛选醚苯磺隆降解菌，并增大醚苯磺隆降解菌的浓度 6.1×109 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 显微计数法 MB-1菌株更容易吸收葡萄糖作为碳源和能源，并且醚苯磺隆具有一定的毒害作用 MB-1菌株的碳源和能源供应不足，导致其产生能分解醚苯磺隆的关键酶不足 200mg/L

【解析】试题分析：本题考查微生物的分离、计数，考查对微生物分离、计数方法的理解。解答此类题目，应明确微生物的分离原理和计数方法，熟练使用计算公式。

（1）取自生产醚苯磺隆农药厂废水处理池中的废水含有醚苯磺隆降解菌，按5%的体积分数接入醚苯磺隆含量为200mg/L的MSM液体培养基中，每3d以5%的接种量接入新鲜的醚苯磺隆MSM液体培养基中，这一培养过程称为选择培养，其目的是初步筛选醚苯磺隆降解菌，并增大醚苯磺隆降解菌的浓度。

（2）菌落数统计应选择菌落数在30～300的培养皿计数，统计稀释倍数为104的培养液涂布的三个培养基，平均菌落数为(58+62+63)/3=61个，则原菌液每升含有的细菌数为61÷0.1×104×1000=6.1×109个，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，该计数方法得到的测量值一般比实际值偏小。若要检测水体中全部细菌（无论是否为活菌）的数目，应采用的方法是显微计数法。

（3）①MB-1菌株更容易吸收葡萄糖作为碳源和能源，并且醚苯磺隆具有一定的毒害作用，因此同时含有葡萄糖和醚苯磺隆的培养基比只含醚苯磺隆的培养基更有利于MB-1菌株的生长繁殖。

②当葡萄糖浓度较低时，MB-1菌株的碳源和能源供应不足，导致其产生能分解醚苯磺隆的关键酶不足，对醚苯磺隆降解能力较弱，据图可知，醚苯磺隆降解率在200mg/L时最高，此时有利于醚苯磺隆降解。