Question

【选修1:生物技术实践】

有机化工原料氯苯不易降解，会污染环境，现欲从土壤中分离高效降解氯苯的微生物。

（1）为了获得能降解氯苯的微生物，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以_______为唯一________源的培养液进行培养，该培养基从用途上来说属于______________培养基。

（2）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L含20mg氯苯的相同培养液中培养(其它营养物质充裕、条件适宜），观测记录3种微生物从实验开始到停止生长所用的时间：甲是14h、乙是3lh、丙是49h，则应选择微生物______________作为菌种进行后续培养。获得菌种后要长期保存，采用__________管藏的方法，此方法需要在____________℃的冷冻箱中保存。

（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可以在_______________下用血细胞计数板直接计数，也可选用_____________法统计活菌数目，一般前者得到的结果___________(填“大于”、“小于”、或“等于”)后者。

（4）若平板培养基中菌落分布很不均匀，则纯化细菌时选用的方法是___________。纯化细菌的另一种方法稀释涂布平板法主要包括__________操作和____________操作。

Answer

氯苯 碳 选择 甲 甘油管 -20 显微镜 稀释涂布平板(活菌计数） 大于 平板划线法 系列稀释 涂布平板

【解析】试题分析：本题考查微生物的培养与分离，考查对微生物培养、分离方法的理解和识记。解答本题应明确微生物分离、计数的原理。

（1）获得能降解氯苯的微生物，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以氯苯为唯一碳源的培养液进行培养，该培养基从用途上来说属于选择培养基。

（2）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1L含20mg氯苯的相同培养液中培养(其它营养物质充裕、条件适宜），微生物停止生长时说明氯苯已被完全分解，甲从实验开始到停止生长所用的时间最短，说明甲分解氯苯能力最强。获得的菌种长期保存，可采用甘油管管藏的方法，此方法需要在-20℃的冷冻箱中保存。

（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可以在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板(活菌计数）法统计活菌数目，由于连在一起的两个或多个细菌形成一个菌落，一般前者得到的结果大于后者。

（4）平板划线法开始划线处菌落较密集，划线结束处菌落较少；纯化细菌的另一种方法稀释涂布平板法主要包括系列稀释操作和涂布平板操作。

【点睛】解答第（2）小题时，应明确微生物在选择培养基上生存的时间即代表其分解氯苯的能力：生存时间越短，说明分解氯苯的能力强越强。