Question

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化善物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。

（1）目的菌株生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的_____________。实验需要振荡培养，由此推测目的菌的代谢类型是_____________。

（2）培养若干天后，应该选择培养瓶中化合物A含量____________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量增多。

（3）接种于固体培养基时，常采用平板划线法和____________法进行接种。平板划线法所用的接种工具是____________，这种工具操作时应采用的灭菌方法是___________。接种时，在第二次及其后的划线操作时，总是从___________开始划线。

（4）某同学将污水样液制成了稀释倍数为l0¹—10⁴的四个稀释样液，分别取0.1mL接种到固体选择培养基上，若在10³组的3个平板上，获得的菌落数是39、38和37，则每升污水样液中的活菌数约为________个。

（5）如果对分离出的细菌进行长期保存，常采用的方法是____________________。

Answer

有机化合物A 异养需氧型 最少 稀释涂布平板法 接种环 灼烧灭菌 上一次划线末端 3.8×108 甘油管藏法

【解析】试题分析：本题考查微生物的分离、计数，考查对微生物分离原理、操作流程和计数方法的理解和应用。

（1）筛选能髙效降解化合物A的细菌，目的菌株生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的有机化合物A。振荡培养可以增加培养液中的溶氧量，由此推测目的菌的代谢类型是异养需氧型。

（2）培养瓶中化合物A含量最少，说明目的菌降解化合物A的能力最强。

（3）常采用平板划线法和稀释涂布平板法法进行接种。平板划线法所用的接种工具是接种环，对接种环可采用灼烧灭菌。接种时，在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线末端开始划线，以逐步减少接种的量。

（4）在103组的3个平板上，获得的菌落数是39、38和37，则每个平板平均菌落数为（39+38+37）/3=38个，每升污水样液中的活菌数约为38÷0.1×103×1000= 3.8×108个。

（5）对分离出的细菌进行长期保存，常采用甘油管藏法。

【点睛】解答第（4）小题时，应注意要求的是“每升污水样液中的活菌数”，而不是“每毫升污水样液中的活菌数”。