Question

研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，进行了相关实验。回答下列问题：

（1）获取菌种:在某热电厂烟囱周围区域采集土样，取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要___________。为了获得目的菌种，应该将采集的土样进行___________处理后，然后接种到培养基上进行培养，培养基中的营养物质一般包括___________、水和无机盐。

（2）分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入S0₂气体，驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通S0₂的时间，与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有较强的___________和___________的能力。

（3）活菌计数:为获得大量的目的菌用于生产，在培养过程中技术人员需连续取样进行计数。稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的___________，因此，统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下，用此计数方法统计的菌落数往往 比活菌的实际数目___________（高/低），这是因为__________________。

（4）检测脱硫细菌对抗生素的敏感性:取该单菌落适当 稀释后的液体2滴，接种于固体培养基表面，并用___________使菌液均匀分布。在37℃培养箱中培养24小时后，将大小相同且分别含有三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置，再培养一段时间后，结果如下图（滤纸片周围的白色区域表示没有菌落分布），据此实验结果推测，三种抗生素中对该菌抑制作用最强的是___________。

Answer

灭菌 稀释 碳源、氮源 利用SO2 耐酸 一个活菌 低 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 涂布器 青霉素

【解析】试题分析：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理。为了获得目的菌种，应该将采集的土样进行稀释处理后，然后接种到培养基上进行培养。培养基中的营养物质一般包括碳源、氮源、水和无机盐。

（2）根据驯化过程可知，驯化过程中不断通入SO2，并且延长时间，与此同时逐步降低培养基的pH，因此分离获得具有耐受SO2和适应酸性环境能力的烟气脱硫细菌。

（3）稀释涂布平板法计数时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于所产生的菌落可能是由两个或多个细胞形成的，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低。

（4）稀释涂布平板法中，可以用涂布器使菌液均匀分布。据图分析，青霉素周围的白色区域最大，说明青霉素对该菌抑制作用最强。

【点睛】解答本题的关键是掌握微生物接种的两种常见的方法，并了解两种方法都可以分离菌种，但是只有一种可以计数。