Question

为了调查赣江的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：

（1）制备实验所需的培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是________和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是____________________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是__________________

（2）该小组可采用上图B所示的_____________（方法）检测水样中的细菌含量。在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________________。

（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是__________________________________。

（4）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离过程中，正确的操作是__________

A．每次划线时，接种环都需要蘸菌液一次

B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种

C．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

D．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风

Answer

（1）调整pH 高压蒸汽灭菌 防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染

（2）稀释涂布平板法 检测培养基平板灭菌是否合格 3．8×107

（3）将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落不连续单个菌落

（4）D

【解析】（1）培养基的制作过程主要有计算、称量、溶化、调节pH、灭菌、分装．培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌．倒平板时要待平板冷凝后，为防止培养皿盖上的泠凝水落入培养基造成污染，常常需要将平板倒置。

（2）微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100=3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103=3.8×107。

（3）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是；将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。

（4）接种环只需要蘸菌液一次，进行连续几次划线操作，A错误；划线分离时，不能把接种环深入到培养基中进行接种，只能在培养基表面进行划线操作，B错误；划线时要将最后一区的划线不能与第一区的划线相连，C错误；在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风，D正确。

【考点定位】微生物的分离和培养

【名师点睛】纯化微生物知识点总结：（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。（2）微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。