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萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α­淀粉酶和β­淀粉酶。α­淀粉酶不耐酸...

萌发的禾谷类种子中淀粉酶活性较强,主要有α­淀粉酶和β­淀粉酶。α­淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β­淀粉酶不耐热,在70℃条件下15 min后失活。

实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。

主要试剂及仪器:麦芽糖标准液、5%淀粉溶液、斐林试剂、蒸馏水、恒温水浴锅等。

实验步骤:

步骤一:制作麦芽糖梯度液。取7支干净的具塞刻度试管,编号,按下表加入试剂,再将试管置于60℃水浴中加热2 min,取出后按试管号顺序排列。

试剂

试管号

1

2

3

4

5

6

7

麦芽糖标准液(mL)

0

0.2

0.6

1.0

1.4

1.6

2.0

蒸馏水(mL)

2.0

1.8

1.4

1.0

X

Y

Z

斐林试剂(mL)

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

2.0

 

步骤二:利用萌发3天的小麦种子制备淀粉酶溶液。

步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15 min,取出后迅速冷却。

步骤四:另取四支试管,编号A、B、C、D,向A、B试管中各加5 mL 5%淀粉溶液,向C、D试管中分别加入2 mL已经处理的酶溶液(忽略其中含有的少量麦芽糖)和蒸馏水,将四支试管置于40℃恒温水浴中保温10 min,然后将C、D试管中的溶液分别加入到A、B试管中,摇匀后继续在40℃恒温水浴中保温10 min。

步骤五:取A、B试管中反应溶液各2 mL分别加入到E、F试管中,然后向E、F试管中分别加入________________后,观察颜色变化。

结果分析:将E试管中颜色与步骤一中获得的麦芽糖标准液进行比较,获得该试管中麦芽糖浓度,并计算出α­淀粉酶催化效率。

请分析回答:

(1)本实验的目的是测定__________________________________________________

(2)步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是________(单位mL)。

(3)实验中B试管所起的具体作用是_________________________________________

(4)请补全步骤五的做法______________________________________

(5)若要测定另一种淀粉酶的活性,则需在步骤________进行改变。

 

小麦种子中α­淀粉酶催化效率 0.6 0.4 0 检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖 2 mL斐林试剂 60℃水浴加热2 min 三 【解析】试题分析:根据题干信息“α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐热,在70℃条件下15 min 后失活”结合实验步骤三:将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15 min ,取出后迅速冷却,这样导致β-淀粉酶失活,因此可得出该实验的目的是探究小麦种子中α-淀粉酶的催化效率。整个实验设计要遵循对照原则和单一变量原则。 (1)将装有淀粉酶溶液的试管置于70℃水浴中15 min,取出后迅速冷却,β淀粉酶不耐热,在70℃条件下15 min后失活,因此,本实验的目的是测定小麦种子中α-淀粉酶的催化效率。 (2)根据探究实验中一定要遵循对照原则和单一变量原则,各个试管中液体的总量要相等,所以步骤一的5~7试管中加入蒸馏水的量(X、Y、Z)分别是0.6、0.4、0(单位mL)。 (3)实验中B试管起对照作用,具体作用是检测实验使用的淀粉溶液中是否存在还原糖。 (4)斐林试剂可鉴定还原糖的存在,必要条件是水浴加热,所以步骤五的做法中要补上2 mL斐林试剂,60℃水浴加热2 min。 (5)α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6以下迅速失活,要测定β-淀粉酶活性,则需在步骤三进行改变。 【点睛】本题关键要抓住题干信息以及关键步骤,分析出实验的目的。再根据设计实验要遵循的对照实验原则和单一变量原则(等量性原则)完善其他步骤即可。  
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考点分析:
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