Question

下图是用多种生物学工程的方法来培育牛奶中含人乳铁蛋白的奶牛的过程。请回答：

(1)图中的A、B分别代表的技术是_____________________________，A中所用培养液的成分除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及___________等物质。

(2)为了快速繁育产人乳铁蛋白的奶牛，通过对筛选子代进行核移植。获取的卵母细胞要培养到________________时期才能进行核移植，得到的动物称作_______________________

(3) 在体外胚胎培养时，应选用囊胚的________进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植，同时获得更多的相同转基因奶牛，该过程应选择__________________的囊胚或桑椹胚进行操作。若对囊胚进行操作，应注意___________________。

(4)检测人乳铁蛋白基因是否成功表达的方法是_______________________________。

Answer

早期胚胎培养和胚胎移植 血清 减数第二次分裂中期 转基因克隆动物 滋养层细胞 发育良好、形态正常 将内细胞团均分 抗原—抗体杂交

【解析】由图可知该题考查PCR过程、基因工程和胚胎工程，涉及了基因工程中基因表达载体的构建，精子的采集、动物细胞的培养、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

（1）图中的A是受精卵形成后的早期胚胎培养技术，因为是要获得产人乳铁蛋白的奶牛，而此时是在体外获得的胚胎需要通过B胚胎移植到母畜体内。培养早期胚胎的培养液的成分除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及天然成分血清等物质。

（2）进行核移植通常选用发育到减数第二次分裂中期的卵母细胞才能作为受体细胞，得到的动物属于无性生殖，称作转基因克隆动物。

（3）要进行性别鉴定应选择囊胚期的滋养层细胞进行基因检测，此时的内细胞具有发育的全能性，有可以用于胚胎分割，但要选择发育良好、形态正常的桑葚期或囊胚期进行操作可以获得大量的胚胎。若对囊胚进行操作，应注意将内细胞团进行均等分割，否则会影响后期的发育。

（4）检测转基因是否表达成功应用抗原-抗体杂交，如果出现杂交带说明表达成功。