Question

下图是基因工程示意图，请据图回答：

（1）从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时，需使用一种特殊的酶是__________________。

（2）进行过程①时，需用_____________酶切开载体以插入目的基因．载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动目的基因转录，该部位称为______________。 

（3）构建基因表达载体的目的是使___________________________。

（4）若用重组质粒转入大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_____________。

（5）在抗虫作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入作物受体细胞时，常用的方法是_____________。

（6）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要用______________做探针，再与相应的物质杂交。

Answer

热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶） 限制 启动子 使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用 未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力弱 农杆菌转化法 标记的目的基因

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）通过PCR进行扩增目的基因时，需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶；

（2）进行过程①时，需用限制性内切酶切开载体以插入目的基因，载体应有RNA聚合酶识别和结合的启动子部位，以驱动目的基因转录；

（3）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用；

（4）若用重组质粒转入大肠杆菌，由于未处理的大肠杆菌吸收质粒的能力弱，要用处理的大肠杆菌作为受体细胞；

（5）在抗虫作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入作物受体细胞时，常用的方法是农杆菌转化法；
（6）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要用标记的目的基因做探针，再与相应的物质杂交。