Question

回答下列Ⅰ、Ⅱ两个小题。

Ⅰ.逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因。(E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点)。

(1)逆转录的模板是________________，原料是_________________________________。

(2)在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是________________，此过程需使用的酶是____________________________。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________________的培养基进行培养。获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组逆转录病毒。

Ⅱ.如图为培育转基因小鼠基本过程的示意图。请回答下列问题：

(3)若A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是__________________，若A为重组逆转录病毒，还可采取________________方法。

(4)小鼠出生后可从其尾巴提取_____________分子，通过____________________方法，可检测出携带目的基因的小鼠。

(5)若目的基因进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是_________________________________________。

Answer

RNA (四种)脱氧核苷酸 F(逆转录病毒序列) 限制酶和DNA连接酶 抗生素A 显微注射(法) 感染(侵染) DNA DNA分子杂交(或核酸分子杂交) 转基因小鼠间相互交配(或杂交)

【解析】

分析题图：图示为一种表达型质粒的结构示意图，该质粒含有E、F、H三种限制酶的酶切位点；含有抗生素A抗性基因，可作为标记基因；含有“逆转录病毒序列”，该序列可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因，获得大量重组逆转录病毒。

（1）逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程，所需要的模板为RNA，原料为四种脱氧核苷酸。

（2）由图可知，在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是F，此过程需使用的酶是限制酶和DNA连接酶。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素A的培养基进行培养，因为其标记基因是抗生素A抗性基因。

（3）如A为重组质粒溶液，将其导入动物受精卵的方法是显微注射技术。

（4）小鼠出生后可从其尾巴提取DNA分子，通过DNA分子杂交，可检测出携带目的基因的小鼠。

（5）若目的基因进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是转基因小鼠间相互交配。