Question

人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

（1）为获取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成总cDNA，这种方法合成的基因与人体细胞内的基因相比,一般没有________、启动子、终止子等结构。

（2）将该HSA基因导入动物受精卵常用的方法是__________。启动子是RNA聚合酶识别结合的部位，启动子的基本组成单位为__________。

（3）利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中,需添加酚类物质，其目的_______________。该方法一般____________(填“适宜”或“不适宜”)用于将目的基因导入单子叶植物。农杆菌中Ti质粒含有___________，称为可转移的DNA。

（4）检测目的基因是否转录，采用_______技术。此方法用_____________探针，进而进行检测。

（5）如果抗虫基因导入成功，且与一条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交，预计后代中抗虫植株占______________。

Answer

mRNA 内含子 显微注射 脱氧（核糖）核苷酸 吸引农杆菌移向这些细胞 不适宜 T-DNA 分子杂交 标记的目的基因 3/4

【解析】

基因工程的操作步骤：目的基因的获取（基因文库获取、PCR、人工合成等）、构建基因表达载体（含目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点）、把目的基因导入受体细胞（显微注射法、农杆菌转化法、钙离子处理法）、目的基因的检测与鉴定（DNA分子杂交法、分子杂交法、抗原-抗体杂交法）。

（1）cDNA是利用mRNA经过反转录形成的DNA组成，不含启动子、终止子和内含子序列。

（2）将目的基因HSA导入动物细胞受精卵常用显微注射法，启动子是一段DNA序列，是RNA聚合酶结合的位点，启动转录。基本单位是脱氧核苷酸。

（3）把目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，该过程中植物体受伤部位会分泌大量的酚类物质，会吸引农杆菌向这些细胞移动，这时Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体DNA上。农杆菌在自然状态下能感染双子叶植物和裸子植物，但对大多数单子叶植物没有感染能力，故农杆菌转化法一般不用于单子叶植物。农杆菌中Ti质粒含有T-DNA，称为可转移的DNA。

（4）要检测目的基因是否转录，可以用标记的目的基因做探针，进行分子杂交，若出现杂交带，说明成功转录。

（5）如果抗虫基因导入成功，且与一条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子（抗虫为显性性状），将该转基因抗虫棉自交，后代中抗虫植株：不抗虫植物=3:1，抗虫植物占3/4。