Question

如图1为某种常用质粒的序列图，Lac Z、Amp为两种标记基因。若质粒和目的基因用Bam HⅠ和BglⅡ两种限制酶切割后(彻底切割)，用DNA连接酶相连(只考虑两个片段相连)，然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的重组质粒(含目的基因)，可获得长度不同的(    )种DNA片段.

A. 1 B. 2 C. 3 D. 4

Answer

D

【解析】

分析图1，质粒中有两个标记基因（Lac Z基因编码的酶能使无色的X-gal变为蓝色，Ampr为氨卡青霉素抗性基因），2种限制酶（BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ）的切割位点共3个，其中BamH Ⅰ有2个切割位点且都位于标记基因——Lac Z基因之中，EcoR Ⅰ只有1个切割位点。

分析图2，目的基因的两端各有1个限制酶酶切位点，分别是BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ，所以要想获得目的基因，必须同时用这两种限制酶进行切割，同时给出了这两种限制酶的识别序列和准确的切割位点，比较发现，两种限制酶切开后露出的粘性末端的碱基序列相同。

若质粒和目的基因用Bam HⅠ和BglⅡ两种限制酶切割后(彻底切割)，用DNA连接酶相连(只考虑两个片段相连)，然后再用BamHⅠ和EcoRⅠ切割成功连接后的重组质粒(含目的基因)，BamHⅠ在标记基因Lac Z基因中剩1个切割位点，在目的基因的一端有1个BamHⅠ切位点，在外源DNA有一个EcoRⅠ切割点，切割后形成4种DNA片段。ABC错误，D正确。故选D。